1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1.前言：

黄酮类化合物是一类广泛存在于植物体内的多酚类物质，种类繁多，具有多种生物活性。槲皮素( quercetin) 及其糖苷衍生物是人类植物性食物和药物成分中最常见、分布最广泛的黄酮之一，为黄酮醇类化合物， 普遍存在于槐米、茶叶、洋葱、生菜、卷心菜、 西兰花、豆类、苹果、桃子、荞麦等几乎所有的植物性食物中，也是许多中草药如银杏叶、桑寄生等的有效成分，是多酚物质中重要的抗氧化剂之一，槲皮素具有抗氧化、抗炎、抗过敏、抗菌、抗病毒、清除体内自由基、抑制恶性肿瘤生长和转移等多方面药理作用，及扩张动脉、改善脑循环和抗血小板活化因子、祛痰止咳、降低毛 细血管通透性和脆性等多种生物活性，能提高免疫能力、降低胆固醇、增强心肌收缩力、 舒张肠平滑肌、降低血压、免疫抑制和抗过敏作用。正是由于槲皮素的广泛分布和多种多样的生物学作用，得到了学术界的普遍关注，成为诸多领域研究的热点。槲皮素分子中含有五个羟基( 3，5，7，3'，4'-五羟基黄酮),体外环境下不稳定,见光易分解、氧化,具有多样的生物学活性和种类繁多的衍生物。槲皮素分子具有高度亲脂性,水溶性差 ,可溶于冰醋酸、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶、丙酮等溶剂,不溶于乙醚、苯、氯仿、石油醚等。槲皮素可以与不同的糖基配体结合增加其溶解性，最常见的是3-oh位置进行糖基化，糖配基主要是葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、木糖等单糖。槲皮素羟基位的糖基基团则可以增加槲皮素衍生物的亲水性，有助于机体更好的吸收。研究表明选择葡糖糖作为槲皮素的糖基配体更有利于肠上皮细胞的lph介导的水解吸收作用。亲脂性向亲水性的改变，可使槲皮素更容易输送到植物各部分的胞质中，利于储存并增加稳定性，具有重要的生物学意义。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究目的：构建重组质粒，实现槲皮素糖苷的生物合成；并分析能够提高产物转化率的优化条件。

研究手段：以糖基转移酶ugt88a1为研究对象，将其构建到pet28a载体，得到pet28a-ugt88a1重组质粒，并导入大肠杆菌bl21(de3)感受态细胞，以大肠杆菌为表达宿主，对糖基转移酶ugt88a1进行异源表达，改善表达策略，测定其酶活等参数。进而将该酶构建到双酶反应循环体系，实现催化反应的可行性，定性定量分析产物生成情况。

建立槲皮素及其糖苷的hplc 定量分析方法。