胶体金法快速检测瘦肉精方法探讨开题报告
2020-05-26 20:27:42
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
瘦肉精的研究现状
1、瘦肉精的定义:
”瘦肉精”是β-肾上腺受体激动剂类化合物的俗称,因其能使动物体内的脂肪分解代谢增强,蛋白质合成增加,瘦肉率大幅提高而得名,包括盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、硫酸沙丁胺醇、盐酸多巴胺等十几种物质。常用的”瘦肉精”通常是指盐酸克伦特罗[1],为白色或类白色的结晶体粉末,味苦,熔点为161℃,由于克仑特罗多残留在动物的肝脏内,故稳定性研究多以肝脏为样本,也有以尿液和肌肉组织作为研究对象的。冻干的小母牛尿液中的克仑特罗在4℃~37℃可以保存一年。煮、烧、烤和微波对加样和阳性组织中的克仑特罗都没有影响。因此,有些残留会进入组织周围的环境或烹调时肉汁中。与其他烹调方式相反,油炸过程中可以影响克仑特罗残留,温度越高,残留越少。克仑特罗在 100 ℃的沸水中是稳定的,在 260 ℃的热油中是不稳定的,半衰期为 5 min。所以我们通常的烹调方式,基本上无法破坏克仑特罗[2]。易溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于乙醚,可由天然儿茶酚胺衍生合成[3] .盐酸克伦特罗于1964年首次在美国合成并获专利[4]。具有加强心脏收缩、扩张骨骼肌血管和支气管平滑肌的作用,最早作为药物用于防治哮喘、治疗休克和支气管痉挛,后由于其副作用太大而遭禁用[5]。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
检测及方法[10]:
1、胶体金免疫层析法(gict)
胶体金免疫层析法是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的,一种新型的免疫标记技术检测卡含有被事先固定于 nc膜检测区(t)的抗原和控制区(c)Ⅱ抗以及固定于结合垫上的金标抗体。当样品中的”瘦肉精”抗原在流动的过程中与胶体金标记的抗体结合,阻止了抗体和nc膜t线上的抗原结合,从而导致检测线颜色深浅的变化。当样本中没有”瘦肉精”或”瘦肉精”浓度低于检测限时,t线显色,检测结果为阴性:当样本中的”瘦肉精”浓度等于或高于检测限时,t线不显色,检测结果为阳性;而无论样本中是否含有”瘦肉精”,c线都会显色,以示检测有效。该检测方法是一种快速定性的检测方法,其特点是成本低,检测流程简单,不需要仪器设备,使用便捷,结果易于判读,可以用于现场检测,因此基层监督检测人员一般采用该检测法对活体动物进行大量筛查,检测样本一般为尿液或血液。但该检测方法的灵敏度低,检测限相对较高,约3 ng/ml,检测结果易受人为、环境等因素的影响而存在一定的误差,实验重复性差,检测结果只能作为一种初步判定,如出现阳性样品,需按照国家检测标准的法定程序进一步确证。
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