1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1荧光素酶简介 萤火虫荧光素酶( firefly luciferase, luc )是生物体内催化荧光素或者脂肪醛氧化发光的一类酶的总称， 是一种能将化学能转化为光能的高效生物催化剂。

早在1884年，dubois发现将萤火虫研磨后荧光很快会消失，添加萤火虫尾部的新鲜提取物后又能重现荧光。

此后，他证实提取物中存在荧光素和荧光素酶的相互作用，并指出在有氧分子、atp的条件下，虫光素酶可催化荧光素氧化并发出便于灵敏检测的荧光。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1 本课题要研究或解决的问题 构建环化蛋白并对表达条件进行优化 2 拟采用的研究手段 （1）构建重组表达载体，并转入大肠杆菌中培养，包括PCR、胶回收、双酶切、培养基配制、接种、取样、涂布等； （2）荧光素酶的诱导表达及纯化； （3）产物检测，包括琼脂糖凝胶电泳、SDS-PAGE电泳等 （4）最佳诱导起始生长量（OD值）的优化； （5）最佳诱导时间的优化； （6）IPTG的最佳诱导量的优化； （7）最佳诱导温度的优化； （8）最佳诱导转速的优化； （9）正交设计，结合各单因素诱导结果，探寻环化酶表达的最佳组合。