竞争及双位点夹心Elisa对单克隆抗体表位鉴定的比较开题报告
2020-05-26 20:47:31
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
抗原表位又称抗原决定簇,它可以是由连续序列(蛋白质一级结构)组成或由不连续的蛋白质三维结构组成,决定抗原性的特殊化学基团。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大,决定簇的数目越多。但各种抗原的决定簇数目不同,如白喉类毒素有8个抗原决定簇,流感病毒有40多个抗原决定簇。抗原决定簇大多存在于抗原的表面,但也有隐藏在抗原内部的,如牛血清蛋白的抗原决定簇多于18个,但只有6个暴露在抗原表面,隐藏于抗原分子内部的抗原决定簇一般是无功能的。抗原分子在酶的作用下,使内部的抗原决定簇暴露出来,才能发挥抗原决定簇的作用。在单克隆抗体(mcab)的特性鉴定中,确定其对抗原构象表位(或抗原决定簇)的特异性是十分重要的。它可为抗原分子的结构和功能分析以及进行生物学方面的研究提供重要的实验依据。
国内抗体生产中对表位的鉴定主要还是依赖elisa实验去检测,elisa发展起步较晚,1985年才研制了我国第一批国产生化诊断试剂。但受益于医疗消费水平的提高、医疗体制改革的推动、国家产业政策的扶持,以及本身具有的一次性消费、快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。所以发展迅速,在当代的抗体生产中,临床检测中应用比较广泛。elisa 可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
在这种elisa检测方法中有三个必要的试剂:
(1)固相的抗原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);
(2)酶标记的抗原或抗体,为"结合物"(conjugate);
(3)酶反应的底物
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1. 单克隆抗体表位在单克隆抗体生产中的意义与作用。
2. 使用elsia实验方法检测抗体表位,实验过程中需注意的事项,影响实验的因素分析。
3. 利用公司实验室现有条件去分析比较竞争抑制法与双位点夹心elisa在表位测定中区别。