文献综述

雷公藤甲素诱导睾丸支持细胞凋亡的试验研究

雷公藤甲素（triptolide)又称雷公藤内酯、雷公藤内酯醇，是雷公藤的主要活性成分之一，其生物活性强，是雷公藤片、雷公藤多苷片等制剂的主要有效成分。雷公藤甲素具有免疫抑制、抗肿瘤、抗炎等多种药理作用[1]，但同时也具有一定的毒性，特别是对雄性生殖系统的影响。它的毒副作用在很大程度上影响了其在临床上的应用。目前关于雷公藤甲素对雄性生殖系统作用机制的研究，较多的是对睾丸组织内相关激素的研究以及对睾丸分泌功能相关因素的研究[2-3]，而睾丸支持细胞凋亡及相关信号通路研究未见报道，因此本实验旨在通过体外细胞实验来探讨雷公藤甲素的生殖毒性作用机制[4]。

一、对雷公藤甲素的药理作用研究[5]

1、雷公藤甲素的抗炎作用

目前认为类风湿性关节炎中关节软骨和骨组织的损害主要是因为滑膜细胞的活化和增生引起的，类风湿性关节炎患者的发病与细胞凋亡过程异常密切相关，滑膜细胞过度增生是源于滑膜细胞凋亡的相对不足而引起的，而雷公藤甲素在低浓度下即可降低其活性作用，抑制滑膜细胞的增生，并且诱导细胞凋亡[6]。邵雪婷等[7]通过对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞体外培养实验的分析结果表明，雷公藤甲素可很明显的抑制TNF刺激引起的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞环氧化酶和诱导型一氧化氮合酶的表达及其诱导产物前列腺素E2(PGE2)等物质的生成，抑制作用与雷公藤甲素浓度呈正相关关系。

2、雷公藤甲素对血管生成的抑制作用

低浓度的雷公藤甲素就可以很明显抑制EC(内皮细胞）的增殖，随其浓度的增加抑制作用更加显著，这显示雷公藤甲素具有较强的抑制血管内皮细胞增殖的活性。这与以前的研究结果是相同的，但其具体机制还不明确，有关雷公藤甲素对血管内皮细胞迁移活性的影响国内外研究的却非常少。通过研究我们发现，在体外培养的脐静脉内皮细胞具有较强的迁移活性，低浓度的雷公藤甲素就可明显抑制细胞的迁移，且呈药物浓度依赖趋势，脐静脉内皮细胞经雷公藤甲素作用后几乎丧失了迁移能力。鸡胚尿囊膜血管非常丰富，其是研究血管生成的理想模型，雷公藤甲素可使鸡胚尿囊膜的血管管腔变细、数目减少，尤其是新生小血管数量减少更为明显，由此更加明确了雷公藤甲素对血管生成有较强的抑制作用。

3、雷公藤甲素对细胞因子作用

雷公藤甲素抑制免疫细胞NF-κB活力是其降低IL-2等多种炎症因子的生成、抑制免疫细胞增殖、诱导细胞凋亡等多种免疫抑制效应的分子机制之一。俞瑜等[8]研究表明雷公藤甲素能同时抑制小鼠T细胞早期活化标志CD69、CD25及细胞因子mRNA的表达，提示这可能是其免疫抑制的机制之一核因子-κB(NF-κB)作为重要的核转录因子，可与多种基因的启动子或增强子特定区域结合进而广泛参与多种基因的表达调控，其中包括多种与免疫炎症反应密切相关的细胞因子和黏附分子；此外免疫细胞内的NF-κB活性改变对细胞的增殖、活化和凋亡均有重要意义，进而直接影响整个机体的免疫状态。在此基础上，刘浩等[9]对免疫抑制作用分子机制的进一步研究表明，雷公藤甲素可上调Jurkat细胞中抑制蛋白(IKB)mRNA的表达水平，导致胞内IKB增多从而抑NF-κB活力。