1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1.阿扎司琼的结构和相关知识

盐酸阿扎司琼，别名N-(1-氮杂双环2.2.2辛-8-基)-6-氯-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并恶嗪-8-甲酰胺盐酸盐， 是一种无色或几乎无色的澄明水溶液，分子式：Cl7H20ClN303#8226;HCl，适用于细胞毒类药物引起的恶心、呕吐和妇科手术及外科手术引起的恶心、呕吐。英文名：Azasetron、 Azasetron Hydrochloride、Nazasetron Hydrochloride

CAS号：123040-69-7。相对分子质量386.28

盐酸阿扎司琼（ Azasetzon hydrochloride AH)是一种新型、高效、高选择性阻断5-HT3受体拮抗剂类止吐药，能有效地控制肿瘤患者应用顺铂等抗癌药治疗时引起的恶心、呕吐等症状，不良反应较少[1]。盐酸阿扎司琼是日本吉富制药株式会社研究开发，于1994年4月在日本上市，其商品名为苏罗同（Serotone），规格为2ml:10mg。

盐酸阿扎司琼主要通过以下合成路线制得:以5-氯-2-羟基苯甲酸甲酯(Ⅱ)为起始原料,经硝化反应生成5-氯-2-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(Ⅲ),经还原反应生成3-氨基-5-氯-2-羟基苯甲酸甲酯(Ⅳ),再与氯乙酰氯发生缩合反应,并进一步环合成6-氯-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯丙口恶嗪-8-羧酸甲酯(Ⅴ),再与硫酸二甲酯发生甲基化反应生成6-氯-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯丙口恶嗪-8-羧酸甲酯(Ⅵ),再水解生成6-氯-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并恶嗪-8-羧酸(Ⅶ),再与N-羟基琥珀酰亚胺发生活化酯化反应生成6-氯-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并恶嗪-8-羧酸N-羟基琥珀酰亚胺活泼酯(Ⅷ),最后与3-氨基喹宁发生胺解反应生成阿扎司琼(Ⅸ),并用盐酸成盐制得I 。

2.药动学和药理的相关知识

阿扎司琼为5-羟色胺3型(5-HT3)受体拮抗剂类止吐药。它具有强效、选择性地拮抗5-HT3受体的作用，而没有多巴胺受体拮抗作用。其与5-HT3受体有高度亲和力，作用强度较甲氧氯普胺(Metoclopramide)强约410倍，为奥坦西隆(Ondansetron)2倍，几乎与格雷西隆(Granisetron)等同。此外，在感觉神经细胞、离体心脏或离体回肠的离体试验中，其显示对5-HT3受体的拮抗作用，该作用较甲氧氯普胺强20～720倍，比格雷西隆强1/8～3倍。

体内或体外试验表明本品对其它受体的亲和力很小或几乎没有。与甲氧氯普胺相比，对5-HT3受体亲和力强而对组胺H1受体的亲和力小。阿扎司琼浓度高达10μmol/L时也未能测出与5-HT1A，5-HT2，多巴胺受体D1、D2，肾上腺受体-α1或α2及毒蕈碱受体的亲和力。

阿扎司琼静注0.1mg/kg或0.3mg/kg，对顺铂(Cisplatin)或阿霉素(Doxorubicin)/环磷酰胺(Cyclophosphamide)所致狗的呕吐有止吐作用；0.3mg/kg几乎完全抑制顺铂所致呕吐，并且止吐作用约持续24小时。此外，静注0.3mg/kg几乎完全抑制放疗引起的狗呕吐。该品止吐作用强度与奥坦西隆或格雷西隆相比为同等或稍强些。其拮抗由顺铂引起的摄食量减少而促进胃排空的胃运动，使受顺铂抑制的胃排空及胃运动趋向恢复状态。

据文献报道,健康男性志愿者静注本品10mg后,3min的血浆中原形药的浓度为190.5μg/ml,其药动学是线性的。阿扎司琼呈双向消除,α相和β相的半衰期分别为0.13h和4.3h。对接受顺铂治疗的恶性肿瘤患者,静注本品10mg后,终末半衰期为(7.3#177;1.2)h,较健康人长。原形药24h由尿排泄量为剂量的(64.3#177;15)%

癌症患者对化疗的担忧令其不能正确认识化疗的有益性，同时害怕并担心身体不能耐受化疗的毒副作用，临床上有10%一20%需要化疗的患者拒绝化疗。顺铂和阿霉素是抗癌谱广的常见抗肿瘤药物，疗效确切，广泛应用于临床，但患者服用期间恶心、呕吐不良反应发生率较高，直接影响了患者服药的顺从性，进而影响化疗效果^[2].(5 - HT)是人体内一种重要的中枢递质，其受体分为5一HT, ,5一HT2,5一HT3和5一HT4等4种类型及若干亚型。与致吐有关的5一HT3受体广泛分布于中枢神经系统、孤束核和外周神经系统(迷走神

经#183;交感神经、副交感神经)的神经元上^[3]。5一HT3受体拮抗药可能作用于迷走神经上的5一HT3受体，抑制迷走神经传入纤维的兴奋，阻断向呕吐中枢的传入，抑制了呕吐症状的发生^[4]。5一HT3受体拮抗剂还可以作用于中枢神经系统上的5一HT3受体，抑制相应神经核团的兴奋。盐酸阿扎司琼为5 - HT3受体选择性阻滞剂，具有较高的亲和力^[5]。

3.阿扎司琼临床应用

肿瘤临床化疗方案的顺利实施以及疗效的取得常受制于化疗药物的不良反应，细胞毒类化疗药物所引起的严重恶心、呕吐是患者不能化疗而中止化疗计划的原因之一^[6]。盐酸阿扎司琼是继昂丹司琼和格拉司琼后出现的一种对5-HT3受体选择性更好、亲和力更强的高效、安全的止吐药物，其对5-H T3受体具有高度的亲和力，对参与锥体外系症状相关的多巴胺D2受体几乎无作用^[7]。有临床前试验表明，盐酸阿扎司琼对5-HT3受体的拮抗作用是甲氧氯普胺的900倍，昂丹司琼的2倍^[8]。此外，日本的临床试验及中国的临床研究表明，它对抗肿瘤药物引起的恶心、呕吐等症状有显著疗效，其疗效可持续24小时^[9]。部分病人出现口渴、便秘、头痛、头晕、腹部不适等,上述反应轻微,无须特殊处理。严重者曾有发生过敏性休克的报道。故使用时应密切观察病人的反应,如发生异常应立即停药,并给予适当处理^[10]。

禁忌证 (1)对本类药物(5-HT3受体阻断剂)及本品过敏者禁用。(2)胃肠道梗阻者禁用。注意事项 本品遇光易分解,注射剂开封后应立即使用,并注意避光。 孕妇及哺乳期妇女用药, 孕妇除非必需外不宜使用。哺乳期妇女使用本品时应停止授乳。儿童用药,尚未确定小儿用药的安全性。老年患者用药, 本品主要从肾脏排泄,由于高龄者多见肾功能降低,会持续血中高浓度,并可能出现头痛等副作用。因此应根据患者状态给药。出现副作用时应减量(例如5mg)。

药物相互作用 (1)阿扎司琼与碱性注射液(如呋喃苯胺酸、甲氨蝶呤、氟脲嘧啶,吡咯他尼等注射液)或鬼臼乙叉甙注射液配伍会发生浑浊或结晶析出,故需将本品先用氯化钠注射液稀释后,方可与上述碱性药物配伍使用。(2)与鬼臼乙叉甙注射液或氟氧头孢钠注射液配伍使用可能会使本品的含量降低,故应在配制后6h内使用。(3)与地西泮注射液配伍会出现浑浊或产生沉淀,应避免与之配伍使用。

缓解肿瘤患者化、放疗所致的恶心、呕吐,一直是困扰医务人员和患者的一大难题,盐酸阿扎司琼作为一种高效、高选择性、使用安全、副作用低的5-HT3受体拮抗剂 ,用于预防和治疗肿瘤化疗、放疗和手术后引起的恶心和呕吐,必将给肿瘤患者带来更大的福音。

4.阿扎司琼注射液含量测定的方法

文献报道阿扎司琼的检测方法有HPLC法、离子色谱法、液相色谱-质谱联用等

4.1 HPLC法

在药品检测中大多数情况都用高效液相色谱法来进行检测，其作用也得到了充分 发挥而且日益明显。渐渐的成为了药品检测中色谱分析法的主流，药品质量控制领域 的关键性技术之一。高效液相色谱是由经典液相色谱衍变发展过来的，高效液相色谱 在药品检测中的飞速发展，使其在药品检测中的应用范围也逐步的扩大^[11]。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析^[12]。

4.2离子色谱法

建立一种离子色谱法准确快速测定盐酸阿扎司琼氯化钠注射液中抗氧化剂亚硫酸氢钠含量的方法。方法采用AS#8212;11阴离子分析柱（4．6mm#215;250mm，5μm）对样品进行分离，以20mmol#183;L-1氢氧化钾溶液为淋洗液，流速1．0mL#183;min-1，抑制型电导检测器检测。样品用0．4％甲醛溶液稀释后直接进样。结果NaHS03线性范围为4．07～30．51μg#183;mL-1，r=0．9997；Na2SO4线性范围为1．59-159．0μg#183;mL-1，r=0．9998；NaHS03、Na2804样品平均回收率（n=9）分别为98．82％，98．24％。此方法操作简便、灵敏、稳定、选择性高，可用于盐酸阿扎司琼氯化钠注射液中亚硫酸氢钠含量的检测^[13]。

4.3 液相色谱-质谱联用

高效液相色谱液-质谱联用技术是把色谱技术的高分离能力与质谱技术的高 灵敏和结构解析能力相结合的一种新技术。被广发应用于药品鉴定、相关物质检测与 定性研究、 检验中药成分等药品检验领域上。我国一般都采用此技术检测成品药中是 否含有非法添加化学药品成分。通过把被测药品与对照品的色谱及质谱的对比来进行 判断，可以有效鉴定出掺杂在药物中的非法添加剂，保证药品的合格^[14]。

液质联用的分离系统是液相色谱，而检测系统为质谱，及利用色谱的分离技术，将混合样品分离成单一的物质，按顺序进入质谱后，只写物质被质谱的质量分析器打成碎片，由质谱检测器来分析物质的结构，利用判断键的断裂方式，通过质核比照相应的对照图库，判断离子碎片的结构，从而对未知药品进行定性定量^[15]。

5.含量测定方法学研究的内容

5.1 线性关系：确保在一定浓度范围内其峰面积与之呈线性关系，确保下面的试验结果的准确性:。

5.2 稳定性：确保在测定结果不因时间而有大幅度变化。

5.3 精密度：在相同操作条件下，同一分析人员在较短时间间隔内测定所得结果的精密度。

5.4 重复性：在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。

5.5 准确度（回收率）：进一步确保工艺的可行性和结果的准确性，一般回收率（%）在95~105%。

5.6高低浓度稳定性：确保样品在高低浓度范围内稳定性较好。

6.总结

建立测定其含量的高效液相色谱（HPLC）分析方法，看该分析方法结果的灵敏度及准确度，有效地控制该产品的质量。

6.参考文献

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[15]刘志广主编.仪器分析.高等教育出版社 P143

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1． 用高效液相方法测定阿扎司琼注射液的含量

1.1 样品与对照品的配制

1.2 测定样品的线性关系、稳定性、精密度、重复性、回收率、高低浓度稳定性和含量测定