ω-转氨酶的高通量筛选方法研究开题报告
2020-06-04 20:30:32
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
一、ω-转氨酶的介绍
ω-转氨酶属于转移酶类,同其他的转氨酶类一样,是催化一个氨基与酮基互换的过程.大部分情况下ω-转氨酶是指一类酶,只要在某个酶催化的转氨反应中,反应的底物或产物中不含有α-氨基酸,就可以称该酶为ω-转氨酶[1].ω-转氨酶催化氨基供体与氨基受体底物之间的转氨反应(乒兵机制),能够在温和条件下拆分伯胺消旋体或者催化合适前手性底物羰基上的不对称加氨,且无外辅因子循环.用ω-转氨酶来生产光学纯的手性胺和非天然氨基酸,可以避免传统化学法的高压高温高能耗高污染,是符合绿色生产理念的先进生物制造[4] .
在转氨反应中,氨基供体首先和plp共价结合形成磷酸吡多胺(pmp),随后pmp把氨基转移给含有羰基的氨基受体,由此完成转氨反应和辅酶的循环.而对于ω-转氨酶高级结构的研究,目前国内和国外仍然不多.主要就是通过对纯酶的单晶进行x 衍射,得到酶结构的基本参数,目前已经分析过的酶来自chromobacterium violaceum、vibrio fluvialis、mesorhizobiumsp.strain luk[5].
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一、本课题要解决的问题
(1)酶活的测定
(2)研究高通量筛选转氨酶的方法
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