基于启动子工程改造脂肽surfactin合成途径任务书
2020-06-06 09:51:53
1. 毕业设计（论文）的内容和要求
生物表面活性剂（surfactin）是由一条β-羟基脂肪酸和具有不同手性的七氨基酸缩肽通过内酯键连接而成。
它是芽孢杆菌产生的一种次级代谢产物，具有可降解，低毒的特点，在医药、食品、生物修复、生物防治等方面具有很大的潜在应用价值。
Surfactin的一大特点就是起泡性，而且芽孢杆菌是好氧细菌，在发酵过程中需要通大量氧气，因而在前期产生surfactin，就会导致菌体与发酵液的流失。
国内外学者针对泡沫，设计了不同消泡装置，增加了建设费用，效果又不是很好，所以亟需一种可以从源头上减少泡沫又不能减少氧气的供应的方式。
细菌生产surfactin是由非核糖体肽合成酶（ NRPS）、sfp蛋白、脂肪酸合成三大模块相互作用组成，目前国内外已有报道通过提高NRPS的合成量从而提高它的产量，但目前没有人通过控制sfp蛋白表达来提高surfactin的产量。
启动子是由基因到蛋白的一个重要元件，它决定着DNA转录到mRNA的数量，因而启动子的强弱就可以控制蛋白产量。
一般surfactin生产菌的sfp蛋白基因启动子是组成型的，可将surfactin合成中必需的Sfp功能蛋白改造成溶氧诱导启动子（vgb promoter）调控,在低溶氧条件下诱导surfactin的合成，减少在发酵过程中消耗的动能，减少泡沫的产生，又不增加泡沫的产生，为产业化提供可能。
1）温习各种查阅文献的方法，在此基础上阅读大量与课题相关资料（尤其是外文文献），及时了解国内外surfactin的研究情况；并学习关于分子生物学的相关操作，设计实验步骤。
2）遵守实验章程，规范实验操作，端正实验态度，并熟练使用各种常规实验仪器。
3） 能够分析和解决实验中出现的各种实验现象，基本具备独立实验能力。
4）及时记录并整理实验数据，学会如何分析处理实验数据及结果，保证实验数据真实性和可靠性。
2. 参考文献
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[11]Willenbacher, J., et al., Substitution of the native srfA promoter by constitutive P-veg in two B. subtilis strains and evaluation of the effect on Surfactin production[J]. Journal Of Biotechnology, 2016. 224: p. 14-17.
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3. 毕业设计（论文）进程安排
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起讫日期 |
设计（论文）各阶段工作内容 |
备 注 |
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12.1~12.31 |
文献查阅及资料研读 |
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1.1~1.17 |
确定实验方案及开题报告写作 |
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1.18~3.28 |
重组质粒与重组菌的构建 |
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4.1~4.30 |
发酵工艺及产量测定 |
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5.1~5.31 |
实验结果分析 |
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