摘 要

近年来益生菌有了越来越大的市场和应用，因其对人体健康有益，常被添加到食品、饮品以及各种保健品中，除此之外，益生菌还具有美容养颜的功效，也会在护肤品种添加益生菌。随着益生菌对人体健康的有利作用不断被发现，人们对益生菌越来越熟知，但与此同时，因其对生存环境有严格的要求，益生菌在不同环境中的存活成为了限制益生菌发展的重大问题，为了探究添加脂肪酸对益生菌生存稳定性的影响，本实验用脂肪酸对植物乳杆菌加以修饰，通过植物乳杆菌在外界热、酸、不同浓度的胆盐以及生理盐水等应激下的存活情况，来验证脂肪酸修饰对益生菌生存稳定性的影响。本实验用到的脂肪酸主要是C18 系列的饱和与不饱和的脂肪酸，包括硬脂酸（C18:0）、油酸（C18:1）、亚油酸（C18:2）、亚麻酸（C18:3），通过将脂肪酸与赖氨酸的混合溶液加入到培养基中对植物乳杆菌进行修饰。实验结果表明，四种脂肪酸修饰对植物乳杆菌的耐热性没有帮助，脂肪酸C18:0对植物乳杆菌的耐酸性有较小提升，脂肪酸C18:1和C18:2对植物乳杆菌的胆盐耐受性有一定的帮助，四种脂肪酸的修饰对植物乳杆菌的生理盐水耐受性均有较大的提升。

关键词：益生菌 耐热 耐酸 胆盐耐受 脂肪酸

The development of probiotics in different environments by adding fatty acids

ABSTRACT

In recent years, probiotics has been growing in the market and has a great application, because it is beneficial to human health,we usually added it to food, beverages and a variety of health products, in addition, probiotics also has the beauty effect, so we also add probiotics in skin care varieties. With the beneficial effects of probiotics on human health have been found, people are increasingly familiar with probiotics, but at the same time, because of its strict requirements on the living environment, there is an important question on the survival of probiotics in different environments. In order to explore the effect of fatty acids on the survival stability of probiotics, Lactobacillus plantarum was modified by fatty acids in this experiment，the effects of fatty acids modification on the survival stability of probiotics were verified by the survival of Lactobacillus plantarum under external stress: heat，acid, different concentrations of bile salts and physiological saline. The fatty acids used in this experiment are mainly C18 series of saturated and unsaturated fatty acids, including stearic acid (C18:0), oleic acid (C18:1), linoleic acid (C18:2), linolenic acid (C18:3). The Lactobacillus plantarum was modified by adding a mixed solution of fatty acid and lysine to the culture medium. The results showed that the four fatty acids did not contribute to the heat resistance of Lactobacillus plantarum, the fatty acids C18:0 had little improvement on the acid resistance of Lactobacillus plantarum, and the fatty acids C18:1 and C18:2 had the same effect on Lactobacillus plantarum tolerance to a certain degree of help, four kinds of fatty acid modification of Lactobacillus plantarum saline tolerance were greatly improved.

Key Words: Probiotics; heat tolerance; acid tolerance; bile salt tolerance; fatty acids

目 录

摘要 I

ABSTRACT II

第一章 绪论 1

1.1 益生菌的开发与研究现状 1

1.1.1 益生菌的概念 1

1.1.2 益生菌研究现状 1

1.2 脂肪酸 1

1.2.1 脂肪酸简介 1

1.2.2 脂肪酸的生理作用以及应用 3

1.2.3 脂肪酸对细胞结构的影响 3

1.3 益生菌对外界生存条件的耐受性 4

1.3.1 耐热性 4

1.3.2 耐酸性 4

1.3.3 胆盐耐受性 5

1.4 生理盐水与细胞 5

1.5 本论文研究的背景和内容 5

1.5.1 本论文研究的目的和意义 5

1.5.2 本论文研究的主要内容 6

第二章 材料与方法 7

2.1 实验材料与设备 7

2.1.1 试验菌株 7

2.1.2 实验试剂 7

2.1.3 主要仪器与设备 7

2.1.4 培养基及配制 8

2.2 试验方法 8

2.2.1 实验菌株的活化及培养 8

2.2.2 接种 8

2.2.3 实验菌株耐热生长情况的检测 9

2.2.4 实验菌株耐酸生长情况的检测 9

2.2.5 实验菌株在添加胆盐的培养基中生长情况的检测 9

2.2.6 实验菌株在添加生理盐水的培养基中生长情况的检测 9

2.3 结果与讨论 9

2.3.1 实验中菌株生长稳定期的比较 9

2.3.2 实验菌株在不同温度下的生长情况 10

2.3.3 实验菌株在酸中不同存放时长下的生长情况 11

2.3.4 实验菌株在添加不同浓度胆盐培养基中的生长情况 12

2.3.5 实验菌株在添加不同浓度氯化钠溶液的培养基中的生长情况 12

第三章 结论与展望 14

3.1 结论 14

3.2 展望 14

参考文献 15

致谢 17

绪论

1.1 益生菌的开发与研究现状

1.1.1 益生菌的概念

益生菌是人体肠道中一类重要的生理细菌，它对人体的有益作用主要是可以维持宿主身体中菌群之间的相互平衡，它能够在人体消化道或生殖系统中定居并且不断生长^{[1, 2]}。俄国细菌学家梅奇尼科夫认为肠道中乳酸菌可以通过抑制有害菌的生长而起到保护人体健康的作用，他第一次发表了益生菌是对人体有利的^[3]。到如今益生菌有了越来越大的市场和应用，因为发现了益生菌越来越多的有益功能，并且得到了消费者的普遍认可。

现今一般认为细菌须具备以下条件才可作为益生菌^[5]：(1) 有利于宿主并且对宿主无害；(2) 在消化道中不会失活；(3) 有良好的耐酸和耐胆盐能力；(4) 可以在消化道中正常生长繁殖；(5) 可以分泌出有利于人体的酶以及代谢物；(6) 在制造和运输保存过程中不会失去活性；(7) 具有较好的感官性能。