一 背景 解脂耶氏酵母是最广泛研究的非常规酵母之一，是作为用于生产基于脂肪酸的生物燃料和生物产品的含油细胞工厂平台。

油解酵母解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）具有生产和储存高等真核生物脂肪细胞三酰甘油的优异能力，除了脂质的生产和生物修饰，解脂耶氏酵母菌能够在特定的发酵条件下分泌低分子量的次生代谢产物如柠檬酸和多元醇以及细胞外酶。

编码解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）主要三酰甘油合成酶的两个基因是DGA1和LRO1。

Lro1是一种酰基辅酶A非依赖性的三酰甘油合成酶，以磷脂为酰基供体。

在含葡萄糖的培养基上缺失DGA1和/或LRO1的解脂耶氏酵母菌株三酰甘油的积累量明显降低。

二Cre/loxp基因重组技术 Cre/loxP重组酶系统，指的是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心，在新型基因打靶中获得广泛应用，是由Sternberg和Hamilton提出 2.1 Cre重组酶和loxP位点 Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。

它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够特异性识别loxP位点。

LoxP（locus of X-overP1）位点长为34bp，包括两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区域。

其中，反向重复序列是Cre重组酶的特异识别位点，而间隔区域决定了loxP位点的方向。

2.2 Cre-loxP重组系统诱导基因重组的方式 Cre-loxP系统存在几种诱导重组的方式，这是基于Cre重组酶与loxP位点的相互作用而实现的。