摘 要

采用响应曲面法优化六月雪齐墩果酸的提取工艺。以齐墩果酸的提取率为考察指标，在单因素实验的基础上分别对料液比、乙醇浓度及提取时间采用响应曲面分析法进行工艺参数的优化。筛选出的最佳的优化提取工艺参数为料液比1:12，乙醇体积分数72%，提取时间2.1h，提取温度85℃，在该工艺参数条件下可使齐墩果酸的提取率达到1.0497%。经响应曲面分析法优化的工艺提取效率高、工艺稳定，并可在连续范围内进行分析，适合对六月雪中齐墩果酸的含量进行优化提取。

关键词：六月雪；齐墩果酸；高效液相色谱；响应曲面法

Abstract

To analyze and optimization extraction technics of Oleanolic acid from Serissa serissoides（DC.）Druce by response surface methodology. With the index for the content of extraction rate of oleanolic acid, On the basis of single factor experiments, using response surface methodology to optimize the process parameters of three factors such as solid-liquid ratio, ethanol concentration and extraction time. The optimizing extraction conditions of Serissa serissoides (DC.) Druce were as follows: solid-liquid ratio was 1:12, ethanol concentration was 72%, extraction time was 2.1h and temperature was 85℃. Under the conditions, theaverage yield of extraction rate of oleanolic acid was 1.0497%. Optimizing extraction technics by response surface methodology have a high efficiency, stabilization process and can be analyzed in a continuous range, suitable for oleanolic acid content from Serissa serissoides (DC.) Druce optimize extraction.

Key Words: Serissa serissoides (DC.) Druce; oleanolic acid; HPLC; response surface methodology

目 录

摘要 I

Abstract II

第1章 绪论 1

1.1 六月雪 1

1.1.1 六月雪简介 1

1.1.2 六月雪的功能主治 1

1.2 齐墩果酸 2

1.2.1 齐墩果酸简介 2

1.2.2 齐墩果酸的物理化学性质 2

1.2.3 齐墩果酸的药理药效 2

1.3 响应曲面法 3

1.3.1 响应曲面法简介 3

1.3.2 响应曲面法的适用条件与范围 3

1.3.3 响应曲面法的特点 4

1.3.4 响应曲面分析的常用方法 4

1.3.5 响应曲面模型拟合与诊断 5

1.4 方差分析 5

1.4.1 方差分析简介 5

1.4.2 方差分析的原理 6

1.4.3 方差分析的主要用途 6

1.5 优化提取工艺 6

1.5.1 正交设计 6

1.5.2 均匀设计 7

1.5.3 单因素设计 7

1.6 研究的意义 7

1.7 国内外的研究现状分析 8

第2章 仪器与材料 9

2.1 仪器 9

2.2 试剂与药材 9

第3章 实验方法 10

3.1 含量测定方法 10

3.1.1 色谱条件 10

3.1.2 对照品溶液的制备 10

3.1.3 标准曲线的绘制 10

3.2 单因素实验 10

3.2.1 料液比的考察 10

3.2.2 乙醇体积分数的考察 12

3.2.3 提取时间的因素考察 12

3.3 响应曲面实验 12

第4章 结果与分析 14

4.1 单因素实验 14

4.1.1 料液比的考察 14

4.1.2 乙醇体积分数的考察 14

4.1.3 提取时间的因素考察 14

4.2 响应曲面优化实验 14

4.2.1 模型的建立 14

4.2.2 回归方程 14

4.2.3 方差分析 16

4.2.4 响应曲面分析 16

4.3 验证实验 17

第5章 结论及展望 20

5.1 结论 20

5.2 展望 20

参考文献 21

致谢 23

第1章 绪论

1.1 六月雪

1.1.1 六月雪简介

六月雪（Serissa serissoides（DC.）Druce），别名为白马骨、满天星、路边姜、天星木、路边荆、鸡骨柴等，是茜草科 ( Rubiaceae) 白马骨属植物，小灌木，有臭气；叶子为革质，卵形至倒披针形，顶端短尖至长尖，边全缘，无毛；叶柄短；根、茎、叶均可入药。六月雪喜欢温暖的气候，畏惧强光，也可耐寒、耐旱；喜欢肥沃、湿润疏松、排水良好的土壤，对环境要求不是很高，生长力较强，多生长于河溪边或丘陵的杂木林内。全国各地均有生产，主要分布于我国东南部和中部各省区，如江苏、安徽、福建、江西、浙江、广东、广西、四川、云南等地。江西赣南地区六月雪的资源丰富，是民间常用草药。

1.1.2 六月雪的功能主治

六月雪味淡、性凉、微辛，具有舒肝解郁、通风解表、清热利湿、消肿拔毒、止咳化痰、舒筋活络、镇惊补虚的功能，临床上用于治疗急性肝炎、感冒、黄疸型肝炎、肾盂肾炎、风湿性关节炎、妇女闭经、白带等症，也可用于治疗带下病、风湿腰腿痛、肠痈、目翳、痈肿恶疮、小儿疳积、狂犬病、蛇咬伤脾虚泄泻等疾病^[1-3]。六月雪的化学成分类型多样，有木脂素、醌类、黄酮类、甾体类等化学成分，当代药理学研究表明六月雪属植物具有抑制酪氨酸酶活性、抗乙肝病毒、抗肿瘤、增强机体免疫力、抑菌等多种生物活性，具有良好的研发前景。六月雪主要用于治疗黄疸、流行性腮腺炎、病毒性肝炎、肾炎水肿、肝硬化、急慢性肝炎、血尿及高血压等症。

六月雪民族用药：苗药药方所记六月雪全草可以治疗偏头痛、头疮、小儿惊风等症。畲药药方所记六月雪全草可以治疗虚劳咳血、痈肿、风寒湿痹、瘰疬、白癜风、湿热黄疸等症。瑶药药方所记六月雪可用于治疗闭经、肝炎、肠炎、痢疾等症。