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摘 要

纤维素的结构比较稳定，由β-葡萄糖苷键连接，因此需要用人和其他动物没有的β-葡萄糖苷酶来对纤维素进行分解。这就导致了β-葡萄糖苷酶在食品生产能源的利用方面具有重要作用，但是β-葡萄糖苷酶具有易降解、易受环境影响等缺点，因此寻找合适的生物材料是改善酶活力的良好途径。本文主要研究了一种八肽（FEFEFKFK）对β-葡萄糖苷酶稳定性和活性等方面的影响。本文运用的研究方法主要用到紫外分光光度法，具体思路是用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷在β-葡萄糖苷酶的催化下进行反应，产物为对硝基苯酚，用紫外分光光度法检测产物吸光度从而间接测定酶的活性。最终的实验结果可以发现，在室温的环境下（25℃），不加肽、加入质量分数为0.1%的肽、加入质量分数为0.5%的肽、以及加入质量分数为1%的肽四种酶溶液中，加入质量分数为0.1%的肽的酶溶液酶活力最大。除此以外，通过酶稳定性实验和酶活力与温度关系实验可得到自组装多肽对酶活力在不同方面的影响。

关键词：β-葡萄糖苷酶，八肽，对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷，对硝基苯基，紫外分光光度法。

Effect of biomaterials on β - glucosidase activity

ABSTRACT

The structure of cellulose is relatively stable, connected by β - glucosidase bond, so it needs β - glucosidase which is not available for human and other animals to decompose cellulose. Therefore, β - glucosidase plays an important role in the utilization of energy in food production. However, β - glucosidase is easy to degrade and is easily affected by the environment. Therefore, finding suitable biomaterials is a good way to improve the enzyme. In this paper, the effect of an octapeptide (FEFEFKFK) on the stability and activity of β - glucosidase was studied. The research method used in this paper mainly uses ultraviolet spectrophotometry. The specific idea is to use p-nitrophenyl-β-d-glucopyranoside as the substrate to react with β - glucosidase. The product is p-nitrophenol. The activity of the enzyme is measured indirectly by ultraviolet spectrophotometry. The final experimental results show that the enzyme activity of the enzyme solution with 0.1% peptide, 0.5% peptide and 1% peptide is the highest in the environment of room temperature (25 ℃). In addition, the effects of self-assembled polypeptides on enzyme activity in different aspects can be obtained through the experiments of enzyme stability and the relationship between enzyme activity and temperature.

Key words: β - glucosidase, octapeptide, p-nitrophenyl - β - d-glucopyranoside, p-nitrophenyl, UV spectrophotometry.

目 录

摘 要 I

ABSTRACT i

第一章 绪论 1

1.1 前言 1

1.2 β-葡萄糖苷酶的介绍 1

1.3 不同物质和环境对β-葡萄糖苷酶活性的影响 1

1.3.1 环境对β-葡萄糖苷酶活性的影响 2

1.3.2 固定化对β-葡萄糖苷酶的影响 2

1.4 自组装多肽 3

1.4.1 自组装多肽的介绍 3

1.4.2 自组装多肽的原理 3

1.4.3 自组装多肽的优势 3

1.4.4 自组装多肽的分类 3

1.5 β-葡萄糖苷酶活性的测定 3

1.6 β－葡萄糖苷酶的前景 5

1.7 研究该课题的方法和意义 5

1.7.1 研究方法 5

1.7.2 研究意义 5

第二章 以对硝基苯酚为样品的标准曲线的建立 6

2.1 实验试剂与仪器 6

2.1.1实验试剂 6

2.1.2 实验仪器 6

2.2 实验方法 6

2.2.1 对硝基苯酚梯度浓度溶液的配制 6

2.2.2 对硝基苯酚为样品的标准曲线的绘制 6

2.2.3 对硝基苯酚 溶液稳定性的检测 6

2.3 实验结果以及讨论 7

2.3.1 对硝基苯酚 标准曲线的测定 7

第三章 酶活力受所加肽的质量分数影响的研究 10

3.1 实验试剂与仪器 10

3.1.1 实验试剂 10

3.1.2 实验仪器 10

3.2 实验方法 10

3.2.1 酶溶液浓度的确定 10

3.2.2 自组装多肽对酶活性影响实验 11

3.2.3 常温环境下自组装多肽对酶稳定性影响的初步实验 11

3.2.4 温度对酶和酶-肽复合物的影响的深入研究 12

3.3 实验结果与讨论 12

3.3.1 酶溶液浓度的确定 12

3.3.2 自组装多肽对酶活性影响 12

3.3.3 加入肽后酶稳定性研究 13

3.3.4 加入肽后酶稳定性随温度影响 14

第四章 总结与展望 17

4.1 总结 17

4.2 展望 17

参考文献 18

致谢 19

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