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摘 要

固定化酶微反应器指的是将生物分子固定技术与生化微反应相结合产生的一种固定化催化装置，这种技术自1960年就开始了相关的研究和利用，可以实现连续反应的同时，稳定性也较高；与传统反应器相比，可以有效降低实验成本、环境污染，同时提高转化率和产率。

漆酶是一种含四个铜离子的多酚氧化酶，是铜蓝氧化酶，以单体糖蛋白的形式存在；可催化多氨基苯、多酚等底物，并且在发生反应后，其唯一产物是水。也因此在近代，随着人们环保意识的上升，有关漆酶的研究也越来越多，同时涉及的领域也从化学、生物转到环境、医学等。

本研究以毛细石英管作为载体，将漆酶固定在毛细石英管上制成微反应器。以愈创木酚作为底物，探究酶促反应的催化过程；通过单因素分析法改变固定化酶的条件，从而增加固定在微反应器上的酶的量；以及确定微反应器与游离酶反应的影响因素，如：反应温度，pH等，明确微反应器具有的相关优势。

关键词：微反应器 固定化酶 漆酶 毛细石英管

Study on Catalytic Process of Immobilized Laccase in Microreactor

ABSTRACT

Immobilized enzyme microreactor refers to an immobilized catalytic device that combines the immobilization of biomolecules with biochemical microreactions,which has been studied and utilized in 1960 and can be continuously stabilized at the same time.The enzyme is fixed in the microreactor and compared with the traditional experimental method,which can effectively reduce the experimental cost and environmental pollution while improving the conversion rate and yield.In the country.

Laccase is a polyphenol oxidase containing four copper ions,copper blue oxidase and in the form of monomer glycoprotein;It catalyzes substrates such as polyaminobenzene and polyphenois,and the only product after the reaction is water.Therefore,in modern times,with the rise of people's awareness of environmental protection,laccase research is also more and more,while the areas involved from the chemical,biological to the environment.medicine and so on.

In this study, laccase was immobilized on a capillary quartz tube as a carrier, and a microreactor was prepared. Using guaiacol as a substrate to explore the catalytic process of enzymatic reaction; by single factor analysis to change the conditions of immobilized enzyme, thereby increasing the amount of enzyme immobilized on the micro-reactor; and to determine the micro-reactor and free enzyme Reaction factors such as reaction temperature, pH,and clearification the relevant advantages of micoreactors.

Key Words: Microreactor ; Immobilized enzyme ; Laccase ; Quartz capillary

目录

摘要 I

ABSTRACT II

第一章 绪论 1

1.1漆酶 1

1.1.1基本性质 1

1.1.2 漆酶的催化 1

1.2 固定化 2

1.2.1 固定化的优势 2

1.2.2 固定化酶 2

1.3 微反应器 3

1.3.1 基本介绍 3

1.3.2 不锈钢微反应器 4

1.3.3 毛细管微反应器 4

1.4 本论文的工作目标及意义 4

第二章 漆酶酶活性的测定 6

2.1 前言 6

2.2 实验部分 6

2.2.1 试剂与材料 6

2.2.2 仪器与设备 6

2.2.3 计算酶活的判定依据 7

2.2.4 分析方法 7

2.2.5 单因素实验初步探究反应条件 9

2.3 结果与讨论 10

2.3.1 时间对酶解的影响 10

2.3.2 温度对酶解的影响 10

2.3.3 pH对酶解的影响 11

2.4 小结 12

第三章 毛细管固定化酶微反应器的相关研究 13

3.1 前言 13

3.2 实验部分 13

3.2.1 试剂与材料 13

3.2.2 仪器与设备 13

3.2.3 毛细石英管酶微反应器的制备及原理 14

3.2.4 毛细管改性后表征 17

3.2.5 APTES流速条件的优化 17

3.2.6 APTES浓度条件的优化 18

3.2.7 APTES偶联时间对偶联效果的影响 18

3.2.8 对固定化条件的研究（单一变量） 19

3.3 酶学性质研究 21

3.3.1 反应最适pH 21

3.3.2 反应最适温度 21

3.4.酶稳定性研究 22

3.4.1 酸碱稳定性 22

3.4.2 热稳定性 23

3.5储存稳定性 23

3.6操作稳定性 24

3.7 小结 25

第四章 结论与展望 26

4.1 结论 26

4.2 展望 26

致谢 27

参考文献 28

1. 绪论

1.1漆酶

1.1.1基本性质

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