论文总字数：23762字

摘 要

本论文建立了同时测定犬血浆中氘代沃替西汀和其主要代谢产物的LC-MS/MS法，并将其应用于氘代沃替西汀的犬毒代动力学研究。色谱方法为：色谱柱：Waters Xterra C₁₈柱（2.1 mm×150mm，5μm，Waters公司）；流动相：10mmol/l甲酸铵-0.1% 甲酸：甲醇= 30:70， 柱温：25℃；流速为0.2ml/min，进样量为5µl。采用的仪器为三重四级杆串联质谱仪,电喷雾离子源，正离子模式，多反应监测模式，质荷比m/z：氘代沃替西汀为302.0→150.0，代谢产物为329.0→286.0，内标卡马西平为237.1→194.1。

结果表明，Beagle犬血浆样本中的内源性物质及其他代谢物几乎不干扰样本的检测，该方法简单快速灵敏，氘代沃替西汀标准曲线的线性范围为5-2000ng/mL，代谢产物标准曲线的线性范围为25-10000ng/mL且在他们的线性范围内线性关系良好。氘代沃替西汀和代谢产物的精密度和准确度，提取回收率和稳定性均符合生物样本检测的要求。该方法成功应用于氘代沃替西汀在Beagle犬体内的伴随毒代动力学研究。

关键词：液质联用技术；氘代沃替西汀；方法学研究；血浆中药物含量测定。

Abstract

A LC-MS/MS method has been developed and validated for the simultaneous determination of deuvortioxetine and its major metabolite in beagle dog plasma. The method was successfully applied to a toxicokinetics study. The analytes and the internal standard were separated on a Waters Xterra C₁₈ chromatography column (2.1 mm × 150 mm, 5μm) using methyl 10 mmol/L ammonium formate-0.1% formic acid and alcohol (30:70)as the mobile phase by isocratic elution at a flow rate of 0.2 mL/min. The column temperature was 25 ℃ and the inject volume was 5μL. The detection was performed on a triple quadrupole tandem mass spectrometer by multiple reaction monitoring (MRM) mode to monitor the precursor-to-product ion transitions of m/z 302.0 → 150.0 for deuvortioxetine , m/z 329.0 → 286.0 for metabolite and m/z 237.1 → 194.1 for carbamazepine (IS) using a positive electrospray ionization interface.

The results showed that endogenous substances and metabolites in plasma didn’t interfere with the determination of plasma samples. The chromatographic system which we used was easy rapid and sensitive. The linearity of the method for deuvortioxetine was 5-2000 ng/mL and for metabolite was 25-10000 ng/mL. The precision and accuracy, extracted recovery and the stability under various conditions of analytes conformed to the requirements of the detection of biological samples. The method was successfully applied to a toxicokinetics study in beagle dogs after oral administration of deuvortioxetine.

Key words: Liquid chromatography tandem mass spectrometry; Deuvortioxetine; Methodology study; Determination of drug concentration in plasma

目 录

摘 要 I

ABSTRACT II

第一章 氘代沃替西汀的综述 1

1.1 氘代沃替西汀 1

1.1.1 基本信息 1

1.1.2 药理作用 2

1.1.3 药代动力学 2

1.1.4 沃替西汀的临床应用 3

1.1.5 检测方法 4

1.1.6 沃替西汀安全性评价 5

1.2 研究依据与目的 5

第二章 犬血浆中氘代沃替西汀的含量测定 6

2.1 仪器与试剂 6

2.1.1 仪器 6

2.1.2 试剂 6

2.1.3 供试品与标准品 7

2.2 氘代沃替西汀方法学研究 8

2.2.1 试剂配置 8

2.2.2 质谱和色谱条件 9

2.2.3 标准曲线制备 10

2.2.4 血浆样品的处理 11

2.3 方法学验证 11

2.3.1 系统专属性实验 11

2.3.2 线性范围和最低定量限 16

2.3.3 稳定性实验 18

2.3.4 精密度和准确度 22

2.3.5 回收率 23

2.4 氘代沃替西汀犬毒代动力学研究 25

2.4.1 试验设计 25

2.4.2 实验动物 25

2.4.3 血浆采集 25

2.4.4 结果 25

2.5 讨论 27

2.6 小结 28

第三章 结论与展望 29

3.1 结论 29

3.2 展望 29

参考文献 31

致 谢 34

第一章 氘代沃替西汀的综述

1.1 氘代沃替西汀

氘代沃替西汀与沃替西汀是结构类似物关系，氘代沃替西汀的原料药是白色固体粉末，其干燥失重0.13%，炙灼残渣为0.02%，有关物质最大单杂率0.046%，总杂为0.077%，氘代率是99.95%，纯度99.92%，沃替西汀作为5-HT_1A受体激动剂，5-HT_1B受体部分激动剂等，5-HT₃,5-HT_1D,受体拮抗剂，5-羟色胺转运蛋白SERT抑制剂等，在人体中与5-HT转运体有很高的亲和力，对于去甲肾上腺素转运体以及多巴胺转运体几乎没有亲和力^[1]。

重性抑郁障碍（major depressive disorder，MDD）已经严重影响患者人际关系，工作和独立生活的能力^[2]，已经成为医学研究中的重要严峻挑战，沃替西汀（vortioxetine）商品名：brintellix，化学名：1-[2-（2,4-甲基苯硫基）苯基]哌嗪，是在2013年9月30日由美国食品和药品管理局批准上市^[3]。

1.1.1 基本信息

名称：沃替西汀

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