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摘 要

本论文对植物乳杆菌Z22胞外多糖进行纯化，得到中性多糖EPS-Z（平均分子量为2.42×10⁵ Da）和酸性多糖EPS-S(平均分子量为3.20×10⁵)。EPS-Z含Man和Glc，其比例为3.22:1.00；EPS-S由Man、Glc、Rham、Gal、Xyl组成，其比例为8.57:6.10:2.42:1.29:1.00，其含GlcUA占单糖总和的7.29%。EPS-Z和EPS-S均为β-型吡喃糖，具有多糖特征吸收峰，具有-OH、-O-、-COO-等官能团。通过抗氧化试验，发现Lactobacillus plantarum Z22的EPS-S和EPS-Z对DPPH自由基，羟基自由基，以及超氧阴离子自由基均有较好的清除能力，分别达到27.75%、66.16%、58%和24.02%、59.03%、45.2%。且EPS-S的抗氧化能力要高于EPS-Z。

关键词：植物乳杆菌 胞外多糖 分离纯化 抗氧化活性

Research on structure characterization and antioxidant activity of lactobacillus plantarum exopolysaccharides

Abstract

In this paper, Lactobacillus plantarum Z22 extracellular polysaccharide was purified and then neutral polysaccharide EPS-Z (the average molecular weight of 2.42×10⁵ Da) and acidic polysaccharide EPS-S (the average molecular weight of 3.20×10⁵ Da) were obtained. EPS-Z contains Man and Glc, with the ratio of 3.22:1.00,while EPS-S contains Man, Glc, Rham, Gal and Xyl, with the ratio of 8.57:6.10:2.42:1.29:1.00, GlcUA accounting for 7.29% of the sum of monosaccharide. EPS-Z and EPS-S are both of β-pyranose with a characteristic absorption peak, meaning that they have -OH, -O-, -COO- and other radicals. By antioxidative test, it was found that EPS-S and EPS-Z of Lactobacillus plantarum Z22 have good ability of scavenging on DPPH free radicals, hydroxyl free radical and superoxide anion free radical, respectively reaching 27.75%, 66.16%, 58% and 24.02%, 59.03%, 45.2%. Moreover, the antioxidant capacity of EPS-S is higher than EPS-Z.

Key Words: Lactobacillus plantarum; Exopolysaccharides; Separation and purification; Antioxidant activity

目 录

摘要 I

ABSTRACT II

第一章 绪论 1

1.1乳酸菌简介 1

1.2乳酸菌胞外多糖 1

1.2.1乳酸菌胞外多糖简介及应用 1

1.2.2乳酸菌胞外多糖类型 2

1.3本文研究内容及意义 2

1.3.1本文主要研究内容 2

1.3.2研究意义 3

第二章 实验内容 4

2.1 引言 4

2.2 实验材料及仪器 4

2.2.1 实验菌株 4

2.2.2 材料 4

2.2.3 仪器与设备 5

2.3 实验方法 6

2.3.1 总糖含量测定 6

2.3.2 多糖纯化 7

2.3.3 UV分析 8

2.3.4 FT-IR分析 8

2.3.5 分子量测定 8

2.3.6 单糖成分分析 8

2.3.7 植物乳杆菌Z22 的EPS的抗氧化能力测定 9

第三章 结果与分析 11

3.1 阴离子柱DEAE-Sepharose Fast Flow分离纯化多糖 11

3.2 凝胶柱Sepharose CL-6B纯化多糖 11

3.3 UV光谱分析 13

3.4 红外光谱分析 13

3.5 多糖中单糖组成分析 15

3.6 分子量测定 17

3.7 植物乳杆菌Z22的EPS抗氧化能力测定 18

第四章 结论与展望 22

4.1主要结论 22

4.2后续工作展望 22

参考文献 23

致 谢 29

第一章 绪论

1.1乳酸菌简介

乳酸菌（Lactic acid bacteria，LAB）是指可利用可发酵的碳水化合物从而产生大量乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称，是兼性厌氧菌，能在低氧或无氧的环境生长，为原核生物，它的最适生长温度在30℃~40℃之间，最适pH值为5.5~6.2，生长所需营养条件除了需要碳源、氮源、各种无机盐，还需要各种促生长因子，条件较高。它们在自然界有着极为广泛的分布，具有丰富的物种多样性，共有200多种，目前至少可分为18个属，以乳杆菌属种类最为多，且在国家明文规定的食品菌中占有很大的比例。除极少数外，乳酸菌绝大部分都是人体内必不可少的菌群，广泛存在于人体的肠道中，具有重要的生理功能。

植物乳杆菌是乳酸菌的菌群一种，最适pH 在6.5左右，属于同型发酵乳酸菌，菌种为直或弯的杆状，单个、有时成对或成链状。其通常缺乏鞭毛，但可进行运动。属革兰氏阳性，不生芽孢。植物乳杆菌常见于蔬菜发酵制品及奶油、肉类中，可定植于肠道对肠道微生物有重要影响。植物乳杆菌无论在食品发酵还是在工业乳酸发酵方面，都有广泛的应用。

1.2乳酸菌胞外多糖

1.2.1乳酸菌胞外多糖简介及应用

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