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摘 要

钩藤是茜草科钩藤属植物，属于中药传统药材。现代研究表明，钩藤的主要有效成分是生物碱，其中以钩藤碱与异钩藤碱为主，具有持久的降血压、抗心律失常以及抗血小板聚集和抗血栓形成的作用。因此，采用合适的方法对钩藤中有效活性成分的提取与分离检测成了近年来研究的热门课题。钩藤中生物碱的提取方法有乙醇提取法，碱化醚提法、碱化苯提法、碱化醇提法等，分离检测方法更是多样，常用的有分光光度法，高效液相色谱法，毛细管电泳法，薄层色谱法等。

本实验的主要内容有:(1)采用乙醇回流提取法对钩藤药材进行提取，得醇提物粗品；2)建立同时分离测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的高效液相色谱方法，并对色谱条件进行优化；（3)以建立的HPLC法测定钩藤醇提物粗品中钩藤碱和异钩藤碱含量，证明方法的可行性及有效性。

关键词：高效液相色谱 钩藤碱 异钩藤碱 分离 含量测定

Separation and determination of active components in Uncaria

Abstract

Uncaria rhynchophylla is Rubiaceae genus uncaria, It^,s a traditional Chinese medicine commonly used to treat headache dizziness,Cold shock, eclampsia, eclampsia, hypertension, etc.Modern research shows that the main active ingredient of Uncaria alkaloid is the rhynchophylline and isorhynchophylline, with long-lasting hypotensive, antiarrhythmic and antiplatelet aggregation and antithrombotic role.Therefore, the use of appropriate methods of Uncaria active components contained in the extraction, separation and detection has become a hot topic of research in recent years.Extraction methods of Uncaria alkaloid including Ethanol extraction method,Alkaline extraction, alkaline extraction, ether benzene alcohol extraction and alkalization.Separation and detection method is more diverse, commonly used with spectrophotometry, high performance liquid chromatography, capillary electrophoresis, chromatography etc.

The main contents of this experiment include：（1）The Uncaria rhynchophylla medicine was extracted by ethanol reflux extraction（2）To develop a high performance liquid chromatographic determination of rhynchophylline and isorhynchophylline Uncaria in chromatography, and the chromatographic conditions were optimized （3）HPLC method was established to extract Uncaria rhynchophylline and isorhynchophylline content, proved the feasibility and efficiency of the method

Key words: high performance liquid chromatography;Rhynchophylline； Isorhynchophylline;separate Determination of content

目 录

摘要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1钩藤简介 1

1.2钩藤总生物碱的提取工艺 1

1.2.1 溶剂的选择 2

1.2.2. 提取方法的考察 2

1.3钩藤测定鉴别方法 3

1.3.1高效液相色谱法^[15] 3

1.3.2毛细管电泳法^[17] 4

1.3.3薄层色谱法^[20] 4

1.3.4紫外分光光度法 4

1.3.5离子液体-微波辅助提取法 5

1.4钩藤研究中存在的问题 5

1.5 本课题的研究意义 6

第二章 实验部分 7

2.1实验材料及仪器 7

2.1.1实验材料 7

2.1.2实验仪器 7

2.2 HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量 8

2.2.2色谱条件 8

2.2.3结果 8

2.2.3.2钩藤药材含量的测定 9

2.2.4讨论 10

2.3钩藤生物碱的提取工艺 10

2.3.1乙醇回流法提取生物碱 11

2.3.2不同乙醇浓度、提取次数、提取时间对生物碱提取率的影响 11

2.3.3结果分析与讨论 11

第三章 色谱条件优化 12

3.1色谱参数计算 12

3.3不同三乙胺浓度对生物碱色谱峰和峰面积的影响 12

3.4不同流动相的配比对色谱图出峰时间的影响 14

3.4.3讨论 15

第四章 结论与展望 16

4.1结论 16

4.2展望 16

参考文献 17

致 谢 19

第一章 文献综述

1.1钩藤简介

钩藤^[1-3]是茜草科钩藤属植物,是我国中药中的传统药材。中药钩藤以茜草科钩藤属钩藤、大叶钩藤、华钩藤或无柄果钩藤的带钩茎枝为主。钩藤适应能力强，对生长条件不高，在温暖湿润、光线充足、排水良好的土壤介质中生长良好。野生钩藤常见于海拔800米以下的山谷，溪边等路边向阳处。在我国主要分布于江西、广西、广东、湖南、云南等南方热带低海拔地区，国外主要分布于日本，马来西亚等国。钩藤为我国传统的中药材，以其干燥的带钩枝茎人药。具有镇静、降压、清热平肝、息风定惊的功能，用于头痛眩晕、感冒夹惊、惊痫舞、妊娠子痫、高血压等症。目前以钩藤为主要药材的药用产品有复方钩藤片，天麻钩藤饮等。

研究表明^[4]，钩藤中发挥药用价值的成分主要是生物碱^[5]。包括钩藤碱(Rhynchophylline)异钩藤碱（Isorhynchophylline）、柯诺辛碱(Corynoxeine)异柯诺辛碱（Isocorynoxeine）柯楠因碱（Corynantheine）柯楠因碱（Corynantheine）二氢柯楠因碱（Dihydrocorynantheine）硬毛帽柱木碱（Hirsutine）等30余种化合物。传统生物碱的提取方法有煎煮法、回流提取法、超声提取法等，由于钩藤中有效成分复杂，含量低，传统方法不仅能源消耗大，产率低,而且很难分离出纯化合物，给后续的科学研究带来一定的困难。

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