论文总字数：19526字

摘 要

为探讨顺铂和5-氟尿嘧啶对MGC-803细胞的影响,我们进行了以下实验：培养MGC-803细胞，在细胞中加药（3、6μg/ml DDP、40、80μg/ml 5-Fu）并对其分别培养24h和48h。在细胞水平上，通过荧光显微镜的观察发现，不同药物、药物的不同浓度，甚至药物的作用时间都对肿瘤细胞有抑制作用。为深入研究，在分子水平上用荧光PCR方法检测，不同的药物对基因的的表达有一定的选择性。在同一作用途径中，DDP一般是加药6μg/ml比3μg/ml的基因表达量大，作用48h的基因表达量要小于24h的，而靶向治疗相关的基因表达恰恰相反；加5-FU的基因表达量一般随着时间的增大表达量越大，随浓度的增大表达量减小。从以上的研究结果我们可以看出，基因的表达在化疗药物的选择过程中起着非常关键的作用，在临床用药上，我们可以通过对各个基因对应的表达量，来选择最适合的化疗药物，从而达到事半功倍的效果。

关键词：胃癌；化疗药物；基因表达；临床用药

Chemotherapy-induced differential expression of MGC-803 cells

Abstract

To explore the DDP and 5-fluorouracil for MGC-803 cells，we conducted the following experiment: MGC-803 cells were cultured, dosing in cells (3,6μg / ml DDP, 40,80μg/ml 5-Fu) and were cultured for 24h and its 48h. At the cellular level, observed by fluorescence microscopy, different drugs and different concentrations of the drug , or duration of action of drugs on tumor cells is inhibited. For further studies at the molecular level using fluorescence PCR method , different drugs on gene expression of a certain selectivity. In the same pathway, DDP is generally greater gene expression than 3μg/ml of dosing 6μg/ml, the role of the gene expression level is less than 24h, 48h, and targeting the expression of the relevant gene therapy contrary; the expression of the gene plus 5-FU with time increases in general the greater the amount of expression, with the concentration increasing expression amount decreases. From the above results we can see, gene expression plays a key role in the selection process of the chemotherapy drugs, in clinical medicine, we can express the amount of each gene corresponding to，select the most appropriate chemotherapy drugs, so as to achieve a multiplier effect.

Keywords: gastric cancer; chemotherapy drugs; gene expression; clinical medicine

目录

摘要 I

Abstract II

一、文献综述 1

1.1 背景介绍 1

1.1.1 肿瘤的介绍及在现实生活中的危害 1

1.1.2 MGC-803细胞来源、培养以及保存 1

1.1.3差别基因表达的定义以及对治疗癌症的作用 2

1.1.4肿瘤个体化治疗的方法以及优势 2

1.2 顺铂（DDP） 3

1.2.1 顺铂的定义 3

1.2.2顺铂的作用机理 3

1.2.3 临床应用 4

1.2.4铂类药物与ERCC1 mRNA表达 4

1.3 5氟尿嘧啶（5-FU） 4

1.3.1 5氟尿嘧啶的定义 5

1.3.2 药理作用 5

1.3.3用途 5

1.3.4作用方式 5

1.3.5 氟类药物与TYMS mRNA 表达 6

1.4 21种基因的介绍及与药物的作用的关系 6

1.5 基因表达差异的检测方法 7

1.5.1基于mRNA水平检测 7

1.5.2基于蛋白水平检测 7

1.6本课题研究内容 8

二、材料与方法 9

2.1材料、试剂与仪器 9

2.2 体外细胞复苏与培养 9

2.3细胞分组及药物处理 9

2.4细胞形态观察 9

2.5 细胞收集 9

2.6 RNA提取 9

2.7 qRT-PCR 10

2.8 统计分析 10

三、结果与讨论 11

3.1 胃癌组织中的基因表达水平 11

3.2药物对细胞形态的影响 11

3.3 DDP、5-FU致MGC-803细胞内与耐药相关基因差异表达 13

3.4 DDP、5-FU诱发MGC-803细胞内与个体化治疗相关基因差异表达 15

3.5 DDP、5-FU使MGC-803细胞内与靶向治疗相关基因差异表达 16

四、结论 19

五、参考文献 20

六、致谢 22

七、附录 23

一、文献综述

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