英语原文共 7 页，剩余内容已隐藏，支付完成后下载完整资料

氧氟沙星滴眼液和眼膏对角膜上皮细胞再生化的影响

日本大阪三藤制药有限公司中央研究实验室

摘要

我们研究了氧氟沙星滴眼液和眼膏对用正庚醇剥落角膜上皮细胞的家兔的角膜上皮细胞再生化的影响。在角膜上皮细胞剥脱后，用以有效的临床浓度局部给药氧氟沙星（浓度为0.3%），持续时间为2天，将其药物效果与抗菌药物滴眼液或眼部软膏诺氟沙星、硫酸庆大霉素、红霉素及土霉素和多粘菌素B的组合进行了比较。除了硫酸庆大霉素之外，氧氟沙星和上述任何一种药物都不影响上皮细胞再生化所需的时间，而硫酸庆大霉素会显著延迟剥脱后10小时的角膜上皮细胞伤口的愈合。这些结果都表明，手术后局部使用氧氟沙星滴眼液或眼部软膏，还有除了硫酸庆大霉素之外的其他抗菌滴眼液或软膏可能不会像硫酸庆大霉素那样影响角膜上皮细胞伤口的愈合。

引言

氟喹诺酮类抗菌药物氧氟沙星，是一种针对常见的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的高效广谱类抗菌药物。滴眼液或眼部软膏形式的氧氟沙星都可以有效的治疗睑缘炎、麦粒肿、泪囊炎、结膜炎和沙眼，还可以用于预防手术期间和术后的感染，因为它对需氧型微生物和厌氧型微生物都是十分有效的。另一方面，对于氟喹诺酮类抗菌药物氧氟沙星的使用，现在的人们还是表示担心的。因为据报道来看，各种抗菌药物制剂都会在体外抑制角膜上皮细胞增殖和伤口愈合。因此这些抗菌药物制剂是否能够用于临床治疗是存在一定疑问争议的。

在本项研究中，我们在实验兔子的身上可以发现，滴注氧氟沙星或其他抗菌药物制剂的滴眼剂或眼部软膏都不会延迟正庚醇剥脱后的实验兔子角膜上皮细胞伤口的愈合。

材料和方法

抗菌药物制剂

所有抗菌药物制剂都是按照临床浓度来使用的，我们在研究实验中分别采用了浓度为0.3%的氧氟沙星滴眼液、浓度为0.3%的诺氟沙星滴眼液、浓度为0.3%的硫酸庆大霉素滴眼液。其中，氧氟沙星滴眼液和硫酸庆大霉素滴眼液中都含有一定量的苯扎氯铵成分作为防腐剂。以氧氟沙星滴眼液或生理盐水中的载体作为对照。将这些药物以50mu;L剂量等分试样的剂量施用到实验兔子眼睛里，，每隔30分钟一次，每天共计16次，持续时间为2天。我们在研究实验中所用的眼膏为浓度为0.3%的氧氟沙星眼膏、浓度为0.5%的红霉素软膏、浓度为0.5%的土霉素软膏，还有10000单位/克的多粘菌素B眼膏的混合物。所有眼膏中都不含防腐剂成分。以氧氟沙星软膏或生理盐水中的载体作为对照。每天要滴注40毫克的试验材料，每隔1.5小时一次，每天共计6次，持续时间为2天。两种载体均是在三腾制药有限公司制备。

动物材料

我们在本研究中选用的是体重为2.5-3.5kg的雄性日本大白兔，按照机构指南和ARVO关于研究中动物使用的决议进行治疗实验。

剥蚀模型

如前文所描述的那样，我们在实验研究中先用正庚醇剥除角膜上皮细胞。采用肌肉注射方式 注射氯胺酮（规格为30mg/kg）和赛拉嗪（规格为5mg/kg）到实验兔子的肌肉内,然后再将浓度为0.4%的盐酸奥布洛卡因盐酸盐试剂施用于实验兔子的眼睛以对其进行局部麻醉处理。当实验兔子失去角膜反射反应后，再将浸有正庚醇的纸蝶（直径约为6mm）小心地放在上皮表面上。60秒后，取出椎间盘，并用盐水彻底冲洗角膜上皮，以确保其已经完全剥脱。将角膜上皮细胞用荧光素染色并照相，以记录上皮去除后0小时、10小时、24小时、31小时（或34小时）和48小时用图像分析仪确定的角膜上皮细胞伤口区域。角膜上皮刚去除后，以及去除后的第二天，将50mu;L的抗菌滴眼液或媒介滴眼液，每隔30min在角膜上皮上涂抹一次，每天要涂抹16次。至于眼部软膏而言，在角膜上皮细胞刚去除后，以及去除后的第二天，将剂量40mg的抗菌药物软膏或赋形剂软膏每隔1.5小时在角膜上皮上涂抹一次，一天要涂抹6次。将盐水以相同方式用于对照组，进行上述实验。

统计分析

用登尼特实验检验确定治疗组与对照组之间每次染色面积差异的统计学意义。

结果

图1显示了在实验滴注了不同的抗菌药物滴眼剂后，角膜上皮细胞的染色面积百分比随时间而减少的情况

图1：抗菌药物滴眼液对实验兔子角膜上皮细胞伤口愈合的影响

染色面积百分比=剥脱后不同时段的染色面积/刚剥除时的染色面积times;100

图2：抗菌药物眼药膏对兔子角膜上皮细胞伤口愈合的影响

染色面积百分比=剥脱后不同时段的染色面积/刚剥除时的染色面积times;100

剥蚀处理后，用氧氟沙星滴眼液，氧氟沙星滴眼液和诺氟沙星滴眼液（图1）剥离后的48小时内，角膜上皮细胞的染色面积以与其他不同组别相同的速率线性减少着。而在这段时间内，相对于各组别的对照组情况，角膜上皮细胞几乎已经完全重新再生成，并且对应的角膜上皮细胞的染色区域基本上每次的都没有存在什么差异。而另一方面，在硫酸庆大霉素滴眼液的滴注组中，实验兔子角膜上皮剥脱后的10小时后的角膜上皮细胞的染色面积明显大于对照组的角膜上皮细胞的染色面积。因此，在与其他抗菌药物滴眼剂相比而言的过程中，似乎只有硫酸庆大霉素滴眼液出现了延迟角膜上皮细胞再生10小时的情况。然而，硫酸庆大霉素滴眼液的实验组的角膜上皮细胞的染色面积在10小时后出现了线性减少的情况，并且在24小时至48小时的这段时间内，角膜上皮细胞的染色面积与对照组的角膜上皮细胞的染色面积相比起来没有什么差异。图2则显示了不同抗菌药物眼膏在使用后角膜上皮细胞的染色面积减少的情况。施用抗菌药物软膏后的染色面积线性下降，这类似于使用滴眼液的情况，但硫酸庆大霉素滴眼液对角膜上皮细胞再形成是有阻滞作用的（图1）。各组的每次盐水对照组都没有出现差异。

表1和表2分别显示了根据图1和图2计算出来的实验治愈率。但硫酸庆大霉素药物的滴注组却无法做到这一点，因为在实验兔子角膜上皮剥脱后的早期（也就是角膜上皮剥脱后10小时之前），可以发现图中存在一个曲线平台，而角膜上皮细胞的染色面积从10小时时线性减少到48小时时。表1和表2所显示的实验治愈率也表明它也是不变的。这些结果都表明这些抗菌药物制剂的局部应用都不影响角膜上皮细胞的伤口愈合速度。

在眼科检查中显示，在所有组别中，角膜上皮剥脱后10小时至24小时这段时间呃逆，注射睑球结膜和球结膜，我们肉眼可以观察到剧烈的排出反应。在31小时之后，除了硫酸庆大霉素药物实验组之外，其他对照组和治疗组的治疗结膜注射均减少到几乎正常水平，此时体内硫酸钾释放液尚未完全消失。即使在48小时后，硫酸庆大霉素药物实验组仍可以观察到结膜的一些弱注入和一些排出。这些宏观观察结果与上述伤口愈合速率计算结果是十分吻合的。也就是可以说，只有硫酸庆大霉素才会有延缓角膜上皮细胞伤口愈合的影响，还会持续结膜感染和排出。

讨论

以前的研究结果已经表明了，氧氟沙星药物以0.5%的高浓度滴注，每天共计4次，持续时长为28天时，不会对兔眼组织如角膜上皮细胞造成任何损伤伤害。而另一方面，据报道说，较高浓度的其他抗菌药物制剂均对此情况有毒。已经有研究表明, 氧氟沙星、环丙沙星以及诺氟沙星类药物对致病菌株都比较为敏感, 且耐药性是强于氯霉素、硫酸庆大霉素等药物的。氧氟沙星、环丙沙星及诺氟沙星等药物属于喹诺酮类抗菌药, 该类药物作用于细菌的脱氧核糖核酸。细菌的双股通过影响细菌DNA回旋酶的活性, 对细菌染色体造成不可逆损害, 从而使细菌不再分裂增殖, 同时该药物对细菌具有选择性毒性, 不受质粒传导耐药性的影响, 从而使得该类药物与许多抗菌药物不产生交叉耐药性。

因此，手术后使用抗菌眼药水或眼部药膏来预防手术后感染，可能会对角膜上皮细胞再生造成一定的不良影响。这一观点得到了下述报道的支持：当兔子角膜上皮剥脱后，局部应用类固醇消炎药或硫酸庆大霉素药物时，角膜上皮细胞的再生化似乎出现了延迟的情况。事实上，在我们目前的研究中，硫酸庆大霉素滴眼液延迟了兔眼角膜上皮剥脱后的上皮再生。在我们本研究中使用的同一模型中，其他人报道了硫酸庆大霉素滴眼液引起兔角膜上皮再生的病理变化和上皮损伤区的闭合延迟。在我们的研究者，硫酸庆大霉素与其他抗菌药物相比，诱导了几次结膜注射与排出。另一方面，对照组和氧氟沙星或其他抗菌治疗组的结膜外观没有差异。因此，可认为，硫酸庆大霉素对角膜上皮细胞的毒性作用是造成上皮再生延迟的原因。

氨基糖苷类抗生素已被广泛用于治疗眼部感染。但是，在日本，是那个钱用于治疗眼部感染的滴眼液是氟喹诺酮，例如氧氟沙星，而不是氨基糖苷。出现这种情况是因为氧氟沙星不仅对厌氧细胞有效，而且对眼组织也很安全，也就是说，治疗中不良反应的发生率较低（浓度lt;0.5%）。氧氟沙星滴眼液为广谱、高效抗菌药，患者使用后在结膜囊内储留时间较长且浓度较高。根据之前所进行的研究显示，氧氟沙星具有润滑性、释药快、水溶性好的优势，并且将这种药物运用到患者运用到患者的治疗过程中，拥有着较长的药效，并且不会给患者的眼部造成刺激，对于干涩、痛痒等眼部症状的彻底改善也有着积极的促进作用。因此，研究氟喹诺酮类药物是否影响体内角膜伤口愈合很重要。虽然进入体循环的有效浓度也相对极小, 以往的一些实验中也未见到过出现过严重的不良反应, 但是并不能排除极个别的患者对此类药物特别敏感, 因此，医生在选用该药物时应全面了解病人病史和正在服用的其他药物、谨慎权衡使用。我们的结果支持氧氟诺酮类药物的使用，因为局部使用临床使用浓度的抗菌药或含氧氟沙星，诺氟沙星，红霉素的眼药膏或土霉素和多粘霉素B的组合不会影响裸露模型中的上皮再生。

据报道，当将40mu;L 的0.3%氧氟沙星施用于兔眼时，在滴注后一小时角膜中达到的最大浓度是3.32mu;g/ml，但到3小时后变得无法测量。基于这些药代动力学数据，似乎体外角膜上皮中存在的剂量高于临床环境中的剂量。注意，本研究中滴眼剂或软膏剂的滴注剂量低于体外使用的剂量，因此，认为当临床滴注氧氟沙星时，引起体外细胞毒性的浓度高于角膜中的浓度。另外，随着第四代喹诺酮类药物的开发, 如莫西沙星、克林沙星、加替沙星等, 其抗菌谱进一步扩大, 重症细菌性角膜炎和结膜炎最大的特点是感染菌多,氧氟沙星是这些抗菌剂中最广谱的抗生素。由于氧氟沙星不会影响上皮的愈合速度，因此建议在手术后预防感染。

主要参考文献

1. S.后藤，T.藤本，A.晒图机，M.小川，S.宫崎，Y.金子，和S. Kuwabata，体外和在DL-8280，一种新的吡啶酮羧酸衍生物，化疗32（体内抗菌活性S-1）：22，1984。

2. K.香川，K.泽，M.竹内，A.梅村，K.渡边，和K.上野，在DL-8280抗厌氧菌，化疗的体外活性 32(S-1): 52, 1984.

3. M. S.大里，H. G.詹森，M.D。特劳斯代尔，J.A. BOSSO，L. R. Borrmann分，J.弗兰克和P.阿克尔，在氧氟沙星体外活性的比较和选择针对眼部细菌分离物，AM眼科抗微生物剂，J.眼药水 108: 380, 1989.

4. Y.三井，S.樱木，0.1田村，M.安倍，我渡边，M.上野，K.铫子，H.佐佐木T.末广，N.大场，S.藤田，Y.宫园，K.榊 ，T.山村，N.渡边，M.Uyama，K.金井，T.户仓，H. Miyatani，M.丝井，Y.儿玉，H.田坂，R.真锅，Y.大桥，Y.下村，K 。佐川，K.西山，K. Norose，S.井上，K.松村，M. Ooishi，F.坂上，A. Oomomo，J.原，S.播野，J.筒井，H.木村，S.井上，M. Higashitsutsumi，M.坂，T. Miwatani和T.小野田，影响氧氟沙星滴眼液治疗眼部外部细菌感染的研究，眼药水.日本. 37: 1115, 1986.

5. S.井上，通过荧光抗体技术和其与新的喹诺酮衍生物治疗，ACTA SOC新生儿衣原体感染的诊断， 眼药水. 日本. 90 1081, 1986.

6. H.盐田，K. Kusujima，和Y三村，成人Chlamydia1结膜炎，ACTA SOC.眼药水. 日本. 90: 1085, 1986.

7. K.松村和Y.三村，上结膜衣原体感染的诊断和治疗的研究，Acta SOC. 眼药水. 日本. 90 1090, 1986.

8. Y.三井和M. Higashitsutsumi，针对沙眼衣原体一个新的喹诺酮衍生物的活性， Acta SOC. 眼药水. 日本. 90 1074, 1986.

9. 电子显微镜观察，氟喹诺酮对沙眼衣原体的影响. Acta SOC. 眼药水. 日本. 92: 973, 1988.

10. E. C.阿方索，D. M.阿尔伯特，K. R.凯尼恩，N. L.罗宾逊，L. Hanninen，和J. D.达米科，体外毒性庆大霉素到角膜上皮细胞，角膜 9(1): 55, 1990.

11. P. E. Cutarelli，J. H.拉斯，H.M。拉扎勒斯，S. C.普特曼和M. R.雅各布，局部的氟喹诺酮类：抗菌活性和体外角膜上皮毒性，普遍定期审议工作组. 10(6): 557, 1991.

12. J. H.拉斯，R. J.麦克，P.S。因佩里亚和H. M. Lazarrus，一种体外的氨基糖苷类角膜上皮毒性分析, 普遍定期审议工作组. 8(3): 299, 1989.

13. J. D.纳尔逊，V.西尔弗曼，P. H.利马，和G.贝克曼，角膜上皮创伤愈合：组织培养物测定法上的抗生素的作用，普遍定期审议工作组. 9(3): 277, 1990.

14. C.辛特龙，L.

剩余内容已隐藏，支付完成后下载完整资料

资料编号：[234352]，资料为PDF文档或Word文档，PDF文档可免费转换为Word