论文总字数：14932字

摘 要

茯苓俗称云苓、松苓，是一类寄生在松树上的菌类植物，古人俗称茯苓为“四时神药”，它与各类药物配合使用，不分四季，都能够发挥它的功能效果。特别是茯苓皮中的三萜类化合物，对肝癌株、宫颈癌株、肺癌株、乳腺癌株、神经瘤母细胞株均有明显的抑制增殖作用。随着科学技术的不断发展，人们对茯苓皮中三萜类化合物的提取及研究已成为几年来的研究热点。所以本次实验是对茯苓皮中的三萜类化合物进行分离、提取及活性的研究。

将茯苓皮研磨打碎，用80%甲醇加热回收提取，得到提取液，将提取液用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯层用甲醇转移，转移后的提取液经过浓缩，液体变粘稠后加入硅胶，硅胶加入后慢慢搅拌，使得浓缩后液体与硅胶完全贴服。拌样后烘干，上硅胶柱，经过层层析出，利用石油醚-乙酸乙酯作洗脱剂，进行梯度洗脱，使用薄层硅胶板点样，与对照品比较，将相同流份合并，最终有15个流份。将母液进行检测，将含有三萜类化合物的母液通过多次Sephadex LH-20柱层析，并进一步结合制备液相，得到了6个化合物，分别是茯苓新酸AM（I），松苓新酸（II），去氢齿孔酸（III），茯苓新酸B（IV），去氢土莫酸（V）和茯苓酸A（VI）。

优化液相条件，采用HPLC-PDA方法，流动相为乙腈-0.5%磷酸梯度洗脱，对茯苓皮中的三萜类部分的液相色谱指纹区进行定性分析，三萜类化合物的液相指纹区的主要峰均可得到鉴定。

关键词：茯苓皮；三萜类化合物；成分提取；分离；指纹图谱。

Abstract

Poria cocos commonly known as poria, tuckahoe, is a kind of parasitic fungi in pine trees.The ancient people commonly known as poria cocos for 4 "magic pill",Its compatibility with all kinds of drugs, regardless of seasons, can play its efficacy.

Especially the triterpene compounds in the tuckahoe peel, the seedlings, lung cancer, breast cancer, cervical cancer, liver cancer strains and glioma cell lines have obvious inhibitory effect of proliferation.With the continuous development of science and technology, people of triterpene compounds in tuckahoe peel extract and research has become a research focus in the past few years.So this experiment is separation, extraction of poria cocos skin of triterpene compounds and active research.

Grinding the tuckahoe peel breaking, with heat recovery 80% methanol extract, extract, extract with ethyl acetate extraction, recovery of ethyl acetate layer with methanol transfer, enrichment to extract shape, add in the silicone sample.

By silica gel column chromatography, petroleum ether and ethyl acetate with gradient elution, track, thin layer into 15 flow.They are poria cocos AM new acid (I), pine three new acid (II), perforation acid (III) to hydrogen, poria cocos new acid B (IV), hydrogen soil mo acid (V) and poria cocos acid A (VI).

Optimized conditions of liquid phase, by adopting the method of HPLC, PDA, mobile phase gradient elution of acetonitrile to 0.5% phosphoric acid, triterpene part of the HPLC fingerprint of poria cocos skin area for qualitative analysis, triterpene compounds in the liquid phase main peak of the fingerprint area can be identified.

Key words:Pachymic acid ; Triterpenoid ; Extraction ; Separation ; Finger print

目录

摘要 III

Abstract IV

第一章 前言 6

1.1选题指导思想 6

1.2茯苓背景介绍 6

1.3三萜类概述 7

1.4三萜类的药理活性 7

1.5三萜类化合物的研究现状 8

1.6纯化方法 11

1.7课题的研究意义 10

1.8课题设计 10

第二章 实验部分 12

2.1.仪器、试剂与材料 12

2.1.1仪器 12

2.1.2试剂 12

2.1.3材料 13

2.2提取分离 13

2.2.1制备茯苓新酸AM（f1） 16

2.2.2制备茯苓新酸和去氢齿孔酸（f2,f3） 16

2.2.3制备茯苓新酸B、去氢土莫酸和茯苓酸A（f4,f5,f6） 16

2.3茯苓皮中三萜类化合物的指纹图谱识别 17

第三章 化合物的结构及鉴定 18

3.1化合物的结构 18

3.2化合物的结构鉴定 31

第四章 结果与讨论 29

4.1各个三萜类化合物图谱 29

4.2课题成果 29

4.3难点与讨论 30

第五章 实验总结 31

致谢 32

参考文献 33

第一章 前言

1.1选题指导思想

几千年以来，中药为中华民族的生生不息的繁衍和中华民族的生命健康作出了巨大的贡献。中药以效果显著，毒副作用微小，能够治疗疑难杂症的独特优点而备受关注。随着科技的发展，中国要广泛的应用于医药、美容、保健扽那个领域。但是中药药效物质基础制约了中药现代化的发展，是中药研究的难点。所以，对于我们而言，用现代化技术建立规范化的中药有效成分分离、提取及活性分析的平台刻不容缓。本文中，将以茯苓皮为实验对象，采用现代化科技技术，分离提取其中的三萜类化合物。

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