文 献 综 述

胃癌是我国乃至全世界范围内最常见的恶性肿瘤之一， 临床诊治的胃癌病例大多处于进展期，伴有淋巴结转移、腹膜种植或血液转移，早期诊断和早期手术治疗是提高胃癌疗效的重要因素之一[1]。全球每年约有90万胃癌新患者，同时有70万人死于胃癌。2005年中国胃癌发病率在男性中达30%，女性中为58.5%。我国每年新发胃癌患者达40万人，死亡人数达30万人，胃癌将是中国的第三大常见肿瘤。胃癌的发病机制受内在因素和外在因素的诱导，内在致癌因素主要表现为遗传家族史原癌基因的表达。外在致癌因素可直接诱发或长期破坏胃黏膜屏障，使促癌物质更易诱发干细胞癌基因表达或基因突变而产生致癌物，让新生不成熟的原始细胞变成各种分化程度不良且生长失控的非正常细胞。

C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是最早认识的重要的急性时相蛋白，Tillett和Francis于1930年首次在急性大叶性肺炎患者的血液中发现，能与肺炎链球菌细胞壁中的C一多糖发生特异性沉淀反应。CRP在炎性或组织损伤发生后6～8 h开始升高，24-48 h达峰值，可升高到平时的100～1000倍而不同于其他蛋白升高(2～3倍)，被誉为炎症标志物[2]。它是一种经典的急性时相反应蛋白，具有激活补体和促进粒细胞及巨噬细胞吞噬的作用[3]，在机体发生损伤、急性炎症、肿瘤等时血清中常有升高，且与肿瘤的恶性潜能有关[4-5]。近期的研究表明，对健康人群来说CRP 的参考范围：lt; 3 mg/L；如 gt;3 mg/L 表示存在某些潜在病理过程(炎症但无症状)。Siemes 等［6］研究提示，血清CRP 增高可作为肺癌诊断的一项指标。在目前许多肺癌标志物敏感度和特异性均不够理想的情况下，CRP 的检测对于肺癌患者的早期发现、病理分型、动态观察及治疗效果和预后判断均具有十分重要的意义［7］。CRP正常范围为0～8 mg/L，＜8 mg/L为阴性，＞8 mg/L为阳性。CRP 是1 种肝脏合成的急性反应性蛋白, 主要功能是调理炎症部位的反应和对抗创伤及感染部位释放的溶蛋白酶的有害作用等。在各种感染性疾病的急性期以及风湿性疾病和恶性肿瘤患者血清中CRP 值均有升高[8] 。CRP是环状均质性分子，在肝细胞中合成．受致炎细胞因子白细胞介素-l、6(interleukin-l，interleukin-6)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)的调节[9]，是机体受到损伤或发生各种急慢性炎症后一种敏感的急性期反应蛋白。CRP可凋理感染、激活补体、参与细胞凋亡，还町以反映炎症的程度．并提供衡量炎症对组织损伤的程度。据研究报道，在肿瘤进展或复发时有包括CRP在内的急性时相反应蛋白的大量合成[10]。如手术治疗后CRP仍维持在高水平(CRIbl00 mgL)，1年病死率高达54％．相比之下，若术后CRP降至正常范围内，则1年病死率仅为10％[11]。另有报道表明CRP水平与胃癌恶性程度有一定的关系，甚至认为可以作为胃癌分期的指标[12]。

检测CRP因子的常用方法有酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法、放射免疫法(radioimmunoassav,RIA）、免疫组织化学(immunohisto chemistry,IHC）、蛋白印迹法（Western Blotting,WB）、流式细胞仪（Flow Cytometry,FCM）、快速CRP测试仪（QUIK READ CRP）。

液态芯片(1iquid chip)是20世纪90年代中期由美国Luminex公司开发的一种生物芯片,该技术将激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机法则整合在一起,在特制的微球上包被抗体、抗原或核酸探针等,可同时检测液相中多种成分,如细胞因子、自身抗体、特定的核酸序列[13]。建立了独特的xMAP ( flexible multi2analyte p rofiling)技术,即”灵活的多项分析模式”或称”多指标同步分析”。xMAP技术原理首先，Luminex运用其独有的技术，使用三种荧光染料给微球染色，调整三种染料的比例可以完成500个不同颜色的微球。根据不同的检测需要，每个微球表面被涂以试剂，试剂中含有扰原、抗体、低聚核酸、酶培养基以及受体。当微珠遇到了试验样品的分析物后，通过涂有不同颜色荧光染料的报告分子，促成每个微球表而的反应完成。然后，让这些微球体迅速通过两束激光，一束用来测定微球的荧光编妈，一束用来测定微球上报告分子的荧光强度。最后，高速数字信号处理器对每个微球进行鉴定，根据荧光指示信号，量化生物检测结果。xMAP技术平台的优势在于：高通量:高速度---因为每个微球体作为单独的检测体，大量的生物检测可从同时进行。”多功能性---单独的xMAP技术可以运用到多种生物检测中来，包括核酸研究、酶学研究、酶学分析、抗原和抗体的结合、受体和配体识别分析以及蛋白质的相互反应。灵活性---xMAP技术可以满足顾客的不同需要，或者在染色的单个微球上附加特异核酸探针，对xMAP技术进行周期性的更新。精确性---xMAP技术产生了实时分析，对生物相互作用进行精确的量化。重复性---在检测标准内的一块地方可以容纳大容量 的微球体，这是固相静态样架所不能媲及的[14-16]。

本实验采用Luminex液相芯片技术，先建立检测方法，进一步检测胃癌患者血清中VEGF的含量，通过数理统计软件计算并分析结果，比较患者与健康人之间的差异。以探讨该方法在胃癌检测中的可行性。

参考文献：

[1] 郑亮，夏加增．胃癌患者血清IL-6、CRP 水平的变化及其与肿瘤血管生成的关系［J］．南京医科大学学报（自然科学版），2011，31(7)：1017-1020．

[2] 黄小琪、林英辉．C-反应蛋白与胃癌临床病理及预后的关系［J］．广西医科大学学报，2007，24(5)：734-735．

[3] 鲁然.C-反应蛋白在临床检验中的意义[J].中国误诊学杂志,2003,3(6):834-835.