摘 要

本文采用高效液相法测定样品中聚山梨酯80的含量和柠檬酸钠的含量。吐温80使用蒸发光散射检测器进行检测，色谱柱为ODS-3(C18),4.5×150mm，5μm，流动相由乙腈和水组成。本方法采用梯度洗脱洗脱，选取漂移管温度为100度，气体流速为2.7L/min，洗脱效果较好。结果显示在0.0106~0.1272g/ml的浓度范围内线性相关性好；枸橼酸钠使用C18(5μm，4.6×250mm)色谱柱进行检测，流动相由95%水（磷酸调PH至2.15）和5%的甲醇组成，流速1.0ml/min,检测波长为210nm，柱温箱温度为30摄氏度，结果显示在8.892~10.748μg/ml的浓度范围内线性相关性好，最低检测限为0.2355μg/ml。通过高效液相色谱法测得样品中吐温80的含量为0.0205g/ml，枸橼酸钠的含量为1.1105mg/ml。

关键词： 吐温80； 枸橼酸钠； 含量 ；高效液相色谱

ABSTRACT

The content of polysorbate 80 and the content of sodium citrate in the sample were determined by high performance liquid phase method. Tween 80 was detected using an evaporative light scattering detector. The column was ODS-3 (C18), 4.5 x 150 mm, 5 μm, and the mobile phase consisted of acetonitrile and water. The method uses gradient elution, and the drift tube temperature is 100 degrees, the gas flow rate is 2.7 L/min, and the elution effect is good. The results showed that the linear correlation was good in the concentration range of 0.0106~0.1272g/ml; sodium citrate was detected by C18 (5μm, 4.6×250mm) column, and the mobile phase was adjusted from 95% water (phosphoric acid to 2.15). 5% methanol composition, flow rate 1.0ml / min, detection wavelength is 210nm, column temperature is 30 degrees Celsius, the results show a linear correlation in the concentration range of 8.892 ~ 10.748μg / ml, the minimum detection limit is 0.2355μg / Ml. The content of Tween 80 in the sample was determined by high performance liquid chromatography to be 0.0205 g/ml, and the content of sodium citrate was 1.1105 mg/ml.

Key words: Polysorbate 80; sodium citrate; Content；High Performance Liquid Chromatography

目录

摘 要 2

ABSTRACT 3

文献综述 5

第一节：聚山梨酯80 5

概述： 5

第二节：枸橼酸钠 7

第三节：本论文的主要研究内容 9

第二章：实验方法的建立 10

2.1实验部分 10

2.1.1 实验仪器 10

2.1.2实验试剂 11

2.1.3 吐温80含量方法的测定： 11

2.1.3.1色谱条件： 11

2.1.3.2HPLC温度和流速的设定 11

2.1.3.3系统适用性实验： 12

2.1.3.4标准曲线的制备： 13

2.1.3.5进样精密度： 14

2.1.3.6回收率实验： 14

2.1.3.7稳定性实验： 14

2.1.4枸橼酸钠的含量测定： 15

2.1.4.1标准品的制备： 15

2.1.4.2色谱条件： 15

2.1.4.3系统实用性实验： 15

2.1.4.5线性范围与标准曲线： 16

2.1.4.6加样回收率试验： 17

2.1.4.7稳定性实验： 17

2.2混悬液中的聚山梨酯80和枸橼酸钠的含量检测： 17

2.3结果与讨论： 18

2.3.1聚山梨酯80 含量测定 18

2.3.2 枸橼酸钠含量测定 20

2.4 本章小结： 24

2.4.1.聚山梨酯80含量测定的方法建立： 24

2.4.2枸橼酸钠含量测定的方法建立： 24

第三章结论与展望 25

参考文献： 25

论文致谢 27

文献综述

第一节：聚山梨酯80

概述：

吐温-80 (Tween-80, polysorbate 80, polyoxyethy-lene-sorbitan20-monooleate) 又名聚山梨酯 80, 化学名为聚氧乙烯-20-山梨醇酐单油酸酯, 属于亲水型非离子表面活性剂,是药物制剂中常用辅料之一[1]。聚山梨酯 80分子中失水山梨醇环和较长的碳链结构具有亲油性，而聚氧乙烯基具有亲水性，醚键氧原子也能与水中氢原子生成氢键 [2]，从而使其对亲脂性成分起到助溶作用，作为增溶剂、乳化剂、稳定剂或润滑剂用于药品和生物制品的制剂过程。其在中药注射剂中的应用尤为广泛，常见的产品包括鱼腥草注射液、香丹注射液、柴胡注射液等,为了提高注射剂澄明度和稳定性，多个品种 选择聚山梨酯80作为辅料，加入量在0.1%～2%[3]。

有研究认为聚山梨酯 80 的加入可能引起注射剂不良反应增加[4]-[5]，主要与辅料本身的特性和所其含杂质有关。也有文献报道聚山梨酯80和加入聚山梨酯80的注射剂可引起家兔红细胞体外溶血和红细胞形态改变[6]-[9]，还可诱发小鼠、大鼠、豚鼠或Beagl犬出现类过敏和过敏反应。进一步研究表明，聚山梨酯80的相对分子质量分布和杂质双氧水的含量与其过敏反应呈负相关[10]-[11]。郭志鑫等对多个中药注射剂中聚山梨酯 80 的加入量进行了考察，发现存在超量使用甚至违规使用现象[12]。因此，制剂中有必要对聚山梨酯80的质量和投料加以严格控制。近年以来辅料对药品安全性的影响日益受到重视，有关聚山梨酯80的研究与监管获得了长足进展，但全面、系统的论述尚未见报道。本文对聚山梨酯 80 的质量评价方法及制剂中聚山梨酯80的含量测定等研究进展进行归纳总结，以期为相关药品的质量控制和安全用药提供参考。

2. 聚山梨酯80的质量标准：聚山梨酯 80 现行标准收载于《中国药典》二部[13]，定义为油酸山梨坦和环氧乙烷聚合而成的聚 氧乙烯20油酸山梨坦，美国药典，欧洲药典，英国药典，日本药局方也均有收录[14]。自2015年版起，《中国药典》将注射用聚山梨酯80的质量标准单列，明确其为植物来源的油酸山梨坦和环氧乙烷聚合而成的聚氧乙烯20油酸山梨坦。与普通药用级别相比，注射用聚山梨酯80的药典标准除对微生物限度有规定外，还额外要求检查吸光度和三甘醇。其余检查项，如酸值、过氧化值、颜色、水分、炽灼残渣、脂肪酸组成等的限度设定也更加严格，见表1。