Fab表达载体的构建任务书
2020-05-15 21:56:21
1. 毕业设计（论文）的内容和要求
通过单克隆测序（mab sequence）获得小鼠杂交瘤细胞产生的抗体的序列，选择合适的表达载体，根据fab序列和表达载体的多克隆位点设计pcr引物并用pcr的方法扩增fab抗体片段，通过重组的手段将fab片段装进表达载体，转染感受态细胞。菌落筛选阳性克隆并送测，分析测序结果，并通过酶切验证正确的fab表达质粒克隆。
最终目标fab表达载体构建成功，可用于后续筛选和鉴定。
论文要求
1．文献查阅
2. 参考文献
1. m arakawa，t yamashiro，g uechi，m tadano，a nishizono：construction of human fab. 《microbiology amp; immunology》, 2007(6):617-625
2. t ando，t yamashiro，y takita-sonoda，k mannen，a nishizono： construction of human fab library and isolation of monoclonal fabs with rabies virus-neutralizing ability.《microbiology amp; immunology》, 2005, 49(4):311#8211;322
3. a mitsue，y tetsu，u gen-ichiro，t masayuki，n akira：construction of human fab (y1/k) library and identification of human monoclonal fab possessing neutralizing potency against japanese encephalitis virus.《microbiology amp; immunology》, 2007, 51(6):617-625
3. 毕业设计（论文）进程安排
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起讫日期 |
设计（论文）各阶段工作内容 |
备 注 |
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2016.1.12 -2016.2.15 |
进行文献检索、阅读资料，撰写开题报告。 |
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2016.2.16 -2016.3.15 |
深入了解学习表达载体相关构造及表达原理，单抗测序的原理，学习使用引物设计及载体设计的软件。 |
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2016.3.16 -2016.4.15 |
通过测序软件分析序列，同时根据表达载体图谱设计扩增Fab片段的PCR引物，抽提小鼠杂交瘤细胞总RNA，做好相关准备工作。 |
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2016.4.16 -2016.5.15 |
完成该课题整套分子生物学实验流程，做好实验记录，分析送测序列，同时进行酶切验证，与导师讨论课题结果。 |
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2016.5.16 -2016.6.1 |
完善实验结构，整理实验数据，完成毕业论文。 |
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2016.6初 |
毕业答辩 |
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