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毕业论文网 > 开题报告 > 化学化工与生命科学类 > 食品科学与工程 > 正文

蔗糖异构酶产物选择性的初步研究开题报告

 2020-05-16 20:20:12  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

1.1 蔗糖异构酶

蔗糖异构酶(又称异麦芽酮糖合成酶,siase)是催化蔗糖异构为异麦芽酮糖(6-o-α-d-吡喃葡糖基-d-果糖,isomaltulose)和海藻酮糖(1-o-α-d-吡喃葡糖基-d-果糖,trehalulose)的关键酶。siase的主要来源是细菌,沙雷氏杆菌(serratia plymuthid)、大黄欧文菌(erwiniarhapontici)、肠杆菌属(enterobactersp.)、红色精朊杆菌(protaminobacterrubrum)、多源发散菌(pantoea dispersa)、克雷伯氏杆菌属(klebsiellasp.)、放射性土壤杆菌(agrobacterium radiobacter)以及嗜中酸假单胞菌(pseudomonas mesoacidophila)等均能产生siase[10]。还存在一种来源于昆虫类(silverleaf whitefly)的siase,其催化蔗糖生成的产物只有海藻酮糖[6]。根据酶催化主产物的种类,分为异麦芽酮糖主产型[1](70%~85%)和海藻酮糖主产型[7](85%~95%)。siase最适反应温度大都在20~40 ℃。一般来说,反应温度越高,反应速度就越快。但高温(50 ℃以上)会加剧蔗糖的水解反应,生成葡萄糖和果糖。siase的最适ph值在5.5~7.0之间[11]

1.2 异麦芽酮糖

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1研究内容

(1)本研究对运用amber 12计算酶与产物的结合自由能,并将其分解得出每个氨基酸残基对产物结合自由能的贡献值,找到贡献值相对最大或最小的氨基酸残基进行定点突变。

(2)本研究对突变体进行出纯化,并对其酶学性质进行了研究,考察了ph和温度对酶活力的影响;考察了蔗糖异构酶的热稳定性和ph稳定性;确定了蔗糖异构酶的km和vmax,并对其产物分布进行分析。

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