霜霉威的结构式

1.1.2霜霉威的理化特性

化学名称是N-[3-（二甲基氨基）丙基]氨基甲酸丙酯，分子式是C₉H₂ON₂O₂，其原药为浅黄色至黄色油状均相液体^[4]。在25 ℃时的溶解度为：在水中867 g/L，甲醇gt;500 g/L，二氯甲烷gt;430 g/L，异丙醇gt;300 g/L，乙酸乙酯23 g/L，在甲苯和乙烷中lt;0.1 g/L。在水溶液中2年以上不分解（55 ℃），但在微生物活跃的水中迅速分解并转化为无机化合物。

1.1.3 霜霉威的作用机理

抑制病菌细胞膜成分的磷酸和脂肪酸的合成，抑制菌丝生长蔓延和孢子囊的形成及孢子萌发。霜霉威是一种广谱杀菌剂，对藻类菌纲真菌特别有效，对丝束霉、盘梗霉、霜霉、疫霉、腐霉等真菌都有良好的杀灭作用^[5]。

1.1.4 霜霉威的功能特点

（1）既可叶面喷雾，又可土壤处理。保护兼治疗，防病又治病；对作物安全，促进作物生长，增产效果明显。

（2）有阻止病菌产生和形成孢子的效果，在植物根部处理能迅速进入根部，不仅防治根部病害，同时能迅速上移到顶部，对地面植物的病害也能进行有效快速防治。

（3）与其他杀菌剂无交互抗性，作用机制独特，不易产生抗药性。剂型为水剂，利于作物完全吸收，不留任何药渍，干净、方便。

（4）对作物安全，在果树蔬菜等作物任何生长期用药均不会产生药害。安全、低毒、低残留，是无公害作物生产的最佳选择。

1.1.5霜霉威的使用注意事项

（1）产品在黄瓜上的安全间隔期为3 天，每季作物施药3~4 次为宜。

（2）本品不可与呈强碱性的农药等物质混合使用。

（3）使用本品时应穿戴防护服和手套，避免吸入药液。施药期间不可吃东西和饮水。施药后应及时洗手和洗脸。

（4）孕妇及哺乳期妇女应避免接触。

1.2 霜霉威的检测

目前，已有的霜霉威检测方法有气相色谱法^［6］、液相色谱法^［7］及液相色谱－串级质谱法^［8］等。其中，气相色谱法通常使用FID 或者NPD 检测器检测，感度较低，在遇到复杂基体时容易受到杂质干扰，影响测定结果; 液相色谱方法使用离子对试剂作为流动相，同样容易受到基体干扰; 液相色谱－串联质谱进行测定时，也存在仪器购置、使用及维护成本较高，易受到基质效应影响，需要通过内标才能准确定量^[9-10]等缺点。

本实验采用的是气相色谱-质谱法。

样品的目标物经乙腈的提取后，用PSA、GCB、C18来进行分散固相萃取净化，气相色谱-负化学源质谱选择离子监测模式测定，同位素内标法定量^[11]。

1.3 气相色谱-质谱仪

气相色谱一质谱联用仪是将气相色谱仪和质谱仪通过一定的接口耦合到一起的化学分离分析仪器。气相色谱一质谱联用仪，其组成包括气相部分(包括气路系统、进样系统、柱箱系统、检测系统)、质谱部分(包括离子源、质量分析器、离子检测器、真空系统)和工作站3部分。该类仪器同时兼具气相色谱仪的高分离能力和质谱仪的高灵敏度优势，在复杂的分析工作中发挥着不可替代的作用^[12]。

1.3.1气相色谱-质谱仪的工作原理

当一个混合物样品注入气相色谱仪的进样口后, 在色谱柱中进行分离, 每种组份以不同的保留时间离开色谱柱出口, 经分子分离器除去载气, 只让组份分子进入离子源.经电离后, 分子离子和碎离子被聚焦成离子束送入四极滤质器.选择滤质器的电场参数, 即可使不同质(m)荷(e)比的离子顺序穿过滤质器, 为二次电子倍增器接收、放大, 形成质谱, 即横坐标为质荷比(m/e), 纵坐标为离子流强度的图形, 可对该化合物定性.另外在色谱柱流出化合物期间, 将重复扫描的每一张质谱中各个m/e的离子相加, 可构成总离子流色谱(TIC)图, 据此, 可对化合物作定量分析.整个工作过程是在真空条件下进行的, 而微型计算机控制着仪器的调整、运行、数据采集和处理^[13]。

1.3.2气相色谱-质谱仪的使用注意点^[14]

1、使用的气体是氦气，纯度是99.999%以上，气瓶的减压阀要在0.5MPa左右。

2、对于低分子量物质，色谱柱温度50-60℃，流量为1 ml/min，对于大分子物质，可用梯度升温和调大流量。

3、长时间不用仪器，要对质谱进行调谐，以确保仪器达最佳状态，一般情况下只要用自动调谐即可。

1.4 QUECHERs方法

QuEChERS方法是一种新型药物多残留的样品制备方法，因具有快速（quick）、简单（easy）、廉价（cheap）、有效（effective）、可靠（rugged） 和安全（safe）的特点而得名。2002年，QuEChERS方法第1次由美国农业部东部地区研究中心首席科学家Lehotay及博士后Anastassiades在意大利罗马举行的第四届欧洲农药残留工作组会议上提出。最初的QuEChERS方法是针对水果和蔬菜中农药残留的前处理方法。此方法一经发现就受到各国农残分析者的普遍关注，发展十分迅速，现已成功地用于多种食品中的数百种农、兽药残留的分析。

1.4.1 QUECHERs方法的步骤^[15]

高湿的样品（干燥的食品需加水）用有机溶剂（乙腈、乙酸乙酯或丙酮）萃取，同时加入盐（硫酸镁、氯化钠或缓冲试剂）以促使溶剂和水的相分离；其次，混合体系经过振摇和离心后， 取部分有机相与吸附剂混合，利用分散固相萃取进一步净化；最后，混合物离心后所得上清液被直接用于分析或浓缩或溶剂交换。

1.4.2 QUECHERs方法的优点^[16]

QuEChERs方法与农药残留的传统分析方法相比具有很多优点。1）对广泛极性和挥发性的农药都有高的回收率（gt;85 %），包括很难检测的分析物；2）采用内标法校正，精密度和准确度高；3）样品通量高，在30～40 min内完成10～20个预先称重样品的检测；4）溶剂消耗和废液很少，且不使用含氯的溶剂；5）该方法可由一个未经大量训练相关技能的人操作；6）每个样品仅需1个可以反复使用的器皿（1个50 mL聚四氟乙烯离心管），清洗容易；7）该方法快速、简单且可靠。在萃取净化过程已除去食品中的脂肪酸和其它有机酸；8）所需空间小，可在小且可移动的实验室完成；9）用分配器加乙腈到容器中，立即密封，可大大减少溶剂与工作人员的接触机会（不用氯化溶剂）；10）该方法廉价，每10 g样品仅需价值1美元的药品；11）采用该方法制备样品仅需粉碎机、天平和离心机各1个。

参考文献

[1] 李飞飞,黄荣茂,胡德禹,等.气相色谱测定土壤中霜霉威的残留[J].农药, 2010, 49(2): 131-132.

[2] 相艳,朱伟军.气相色谱内标法测定霜霉威原药含量[J].农药, 2013, 52(7): 503-504.

[3] 冯大军.霜霉威#8212;霜霉病防治首选药.《果农之友》,2011(3): 32-32.

[4] 李友顺,吴进龙,王小丽,陈铁春,单炜力.中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB 22621#8212;2008.霜霉威原药[S].北京:中国标准出版社, 2009, 4(1): 1-1.

[5] 刘润珠,张靖坤,崔淑华.气相色谱-质谱法测定大葱基质中霜霉威残留量.分析测试学报, 2012, 12(31): 36-36.

[6] 马佰慧,秦志伟,谭行之.利用气相色谱检测黄瓜果实中霜霉威的残留量[J].长江蔬菜(学术版), 2010(20): 51-53.

[7] 周建科,张明翠,刘瑞英,等.基质固相分散-高效液相色谱法测定番茄酱中氨基甲酸酯类农药[J].中国调味品,2009, 34(10): 76-78.

[8] 潘艳坤,韦英亮.液相色谱-串联质谱法测定黄瓜中霜霉威残留[J].理化检验-化学分册,2012, 48(6): 646-648.

[9] Hiemstra M,de Kok A.J. Chromatogr. A, 2002, 972(2/4): 231－239.

[10] Taylor J C,Hird S J,Sykes M D,Startin J R.Food Additives＆Contaminants:Part A, 2004, 21(6): 572－577.

[11] 沈伟健,曹孝文,刘一军,张睿,范欣,赵增运,沈崇钰,吴斌.气相色谱-负化学源质谱法测定蔬菜中17种拟除虫菊酯内农药残留量.色谱, 2012, 11: 1172-1177.

[12] 雷军锋,孔小平,唐博,袁晓丽.气相色谱-质谱联用仪校准常见问题及解决方法.化学分析计量, 2015, 5:94-96.

[13] 回瑞华,侯冬岩,李铁纯.气相色谱-质谱仪及其应用.鞍山师范学院学报,2001, 9, 3(3): 41-44.

[14] 崔晓晨,李秋兰,孟祥铭.对气相色谱质谱联用仪使用过程中存在问题的探讨.山东工业技术, 2015, 5: 148-148

[15] Kinsella B,Lehotay S J,Mastovska K,et al. New method for the analysis of flukicide and other anthelmintic residues in bovine milk and liver using liquid chromatography - tandem mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta, 2009, 637(1/2): 196-207.

[16] Lehotay S J,de Kok A,Hiemstra M,et al. Validation of a fast and easy method for the determination of residues from 229 pesticides in fruits and vegetables using gas and liquid chromatography and mass spectrometric detection[J]. Journal of Aoac International, 2005, 88(2): 595-614.