摘 要

萘普生（NPX）是一种新型污染物，已在城市污水及自然环境水体中被频繁检出，同时萘普生又是一种手性分子，市售主要是S-萘普生（NPX-S），但是在污水处理厂中S-萘普生会转化为R-萘普生(NPX-R)，关于NPX-R的生态毒理目前还没有相关研究。为了研究萘普生对水生脊椎动物早期发育影响，实验采用斑马鱼作为生物模型，使用不同浓度的NPX-S和NPX-R溶液对斑马鱼胚胎进行暴露实验，观察其在不同浓度的萘普生培养液中的胎动、体长、畸形率、游泳频率以及心率变化。实验研究发现：低浓度的萘普生对斑马鱼的胎动、心跳、游泳频率没有显著的影响，高浓度的萘普生对斑马鱼胎动、心跳及游泳频率有抑制作用。暴露在高浓度的萘普生培养液中，斑马鱼胚胎和幼鱼出现明显的心包水肿、血凝、脊柱弯曲等畸形现象。随着时间的增长，斑马鱼会逐渐适应萘普生的毒性。NPX-R相对于NPX-S对斑马鱼发育毒性稍小。NPX在低浓度时会对斑马鱼体内酶活性产生抑制作用，在高浓度时会对酶活性产生诱导作用，提升斑马鱼体内活性。相比于NPX-R，NPX-S对斑马鱼体内酶活性破坏性更大。

关键字：萘普生 斑马鱼 发育毒性 酶活性

Effects of naproxen on the early development of aquatic vertebrates

Abstract

 Naproxen, as an emerging pollutants, has been detected in urban sewage and other environmental water samples. Naproxen is a chiral molecule, there is mainly NPX-S available in market. However, NPX-S in the sewage treatment plant can be converted to NPX-R, which lead to its detection in aquatic environment. In order to study the effects of Naproxen on the development of aquatic vertebrates, zebrafish was used as a biological model to study the ecotoxicity of NPX-S and NPX-R on the fetal movement, body length, deformity rate, swimming frequency and heartbeat of zebrafish at different concentrations. The experimental results showed that the low concentration of NPX had no significant effect on the fetal movement, heartbeat and swimming frequency, and the high concentration had an inhibitory effect on the development of zebrafish. When exposed to high concentrations of naproxen solution, zebrafish showed obvious deformities such as ventricular edema, blood coagulation and body bending. When the exposure time extended, zebrafish will gradually adapt to naproxen's toxicity, and the malformation rate will be greatly reduced. NPX-R is slightly less toxic to zebrafish than NPX-S. NPX can inhibit the enzyme activity in zebrafish at low concentration, and induce the enzyme activity at high concentration to enhance the activity of zebrafish. In comparision with NPX-R, NPX-S has a greater destructive effect on zebrafish enzyme activity.

Key Words: Naproxen; Zebrafish; Developmental toxicity; Enzymatic activity

目录

第一章 绪论 1

1.1萘普生的生态毒理研究 1

1.1.1萘普生的简介 1

1.1.2对萘普生生态毒理研究现状 1

1.2斑马鱼在毒理实验中的应用 2

第二章 萘普生对斑马鱼发育毒性实验 3

2.1实验仪器与药品 3

2.2实验模型生物 3

2.3实验方法 4

2.4结果与讨论 4

2.4.1萘普生对斑马鱼胎动的影响 4

2.4.2萘普生对斑马鱼心率的影响 5

2.4.3萘普生对斑马鱼体长发育的影响 6

2.4.4萘普生对斑马鱼游泳频率的影响 7

2.5萘普生对斑马鱼发育畸形的表现 8

2.6本章小结 9

第三章 萘普生对斑马鱼体内酶活性影响实验研究 10

3.1实验所需器材以及药品 10

3.1.1实验器材 10

3.1.2实验药品 10

3.2实验模型生物 11

3.3实验方法 11

3.3.1配制胚胎培养液和NPX溶液 11

3.3.2胚胎暴露实验 11

3.3.3制备组织匀浆 11

3.3.4 蛋白质含量的测定 12

3.3.5 羟自由基测定 13

3.3.6 GST活力测定 13

3.3.8 LDH活力测定 15

3.3.9 CAT活力测定 15

3.4结果与讨论 16

3.4.1 蛋白质含量 16

3.4.2抑制羟自由基的能力 17

3.4.3 GST活力 18

3.4.4 GSH活力 19

3.4.5 LDH活力 20

3.4.6 CAT活力 21

3.5本章小结 22

第四章 结论 24

参考文献 25

致谢 27

第一章 绪论

1.1萘普生的生态毒理研究

1.1.1萘普生的简介

萘普生（Naproxen，NPX）是一种典型的非甾体抗炎药（NSAIDs）^[1]。其化学名为( )α-甲基-6-甲氧基-2-萘乙酸，化学分子式为C₁₄H₁₄O₃，具有消炎、镇痛和解热等功能，广泛用于治疗风湿性关节炎和骨关节炎等炎症。由于萘普生在消炎、止痛等方面效果显著，所以这种非甾体抗炎药在世界上都有广泛的应用。同时，萘普生是一个手性分子，萘普生的α位为手性碳原子，因此萘普生存在一对光学活性对映体( 如图1所示) ，但 R-萘普生（NPX-R）和S-萘普生(NPX-S)的药效不同，S型萘普生构型的药效为R型萘普生构型的28倍^[2-4]。市售主要是S-萘普生，但是在污水处理厂中S-萘普生会转化为R-萘普生，R-萘普生的生态毒理目前还没有相关研究。

相关图片展示：