南京某河蟹养殖水环境中磺胺类抗生素抗性细菌及抗性基因初步研究开题报告
2021-12-12 14:08:31
1. 研究目的与意义及国内外研究现状
如今中国水产品产量己经连续年稳居世界第一,且南京河蟹养殖所占比例不断提高,我国己成为世界上唯一水产养殖高于捕捞产量的国家。但是在水产养殖发展的同时,由于放养密度过高、环境污染严重等原因,致使各种疾病的发病率越来越高,各种抗生素在水产养殖中被广泛应用。而渔药在生产和使用过程中普遍存在缺乏法律法规的指导和约束、监督管理混乱等情况,更加缺乏完善的渔药残留监控体系,使得渔药滥用和非法使用现象严重,这不仅导致水产品中药物残留,更对水生态环境产生了巨大的潜在威胁。
磺胺类抗生素是应用较早的一类人工合成抗菌药物,具有抗菌谱广、疗效强、方便安全等优点,在水产养殖中应用较为广泛。磺胺类抗生素是水产养殖业中广泛使用的抗菌药物,具有高水溶性、低螯合能力和低结合常数等特点,施用于动物后大部分会以原药或代谢物的形式经动物粪便和尿液排出并最终进入环境。它们在环境中的残留和长期存在,将胁迫微生物产生耐药性,并可能通过基因水平转移方式传递到其他菌群,进一步通过食物链传递到人体,威胁人类生命安全。长期滥用磺胺类抗生素会导致动物体内及环境中磺胺类耐药菌(antibiotics resistant bacteria,arb)大量繁殖,诱导产生抗生素抗性基因(antibioticsresistance gene screening,args ),对养殖区域及其周边环境造成潜在的基因污染。args不仅破坏了各种微生物种群数量和结构的平衡,一旦传递进入人类致病菌内,将降低感染性疾病治愈的可能性,对人体健康造成极其严重的威胁。2011年世界卫生日的主题“抵御耐药性--今天不采取行动,明天就无药用”,道出了遏制抗生素耐药性蔓延的紧迫性。因此对水体环境中磺胺类抗生素抗性细菌及抗性基因进行有效而灵敏的研究是刻不容缓的。
目前围绕河蟹养殖水环境中磺胺类抗生素药物的研究多集中在痕量检测,或者药物动力学研究等方面,而对其在水环境中尤其是河蟹养殖水环境中的毒性效应方面的研究极少,所以有必要进一步开展其相关的生态毒理研究。国内外研究现状
磺胺类化合物最早报道于1906年,其结构中具有对氨基苯磺酰胺母核,起初是作为染料来使用的,其抗感染作用被德国拜耳公司的多马克于1932年发现,用于治疗由葡萄球菌引起的败血症。其后的研究显示:磺胺类化合物具有广谱抗革兰氏阳性和阴性菌的作用,因此吸引了众多医药研究人员的关注,并在此后的十余年时间中相继开发出包括磺胺吡啶、磺胺噻唑和磺胺嘧啶等抗菌药物,到年二战结束,市场上的磺胺类药物品种已超过5400种,常见的有磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺酰胺等。在密集农牧业养殖中,不论发达国家还是发展中国家,磺胺类药物经常被单独使用或是与其它抗菌药联用来预防和治疗腹浑和其他感染疾病。磺胺类药物具有抗菌谱广、价格低廉、化学性质稳定、使用方便等优点,被广泛使用于牲畜养殖业中,是使用量最大的兽用抗菌药之一。例如,挪威,英国,韩国,瑞士和丹麦兽用磺胺类 药物使用量分别占其国家总兽用抗生素使用量的25、19、15、15和12%。调查表明常用的兽用磺胺类药物有:磺胺嘧啶,磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺氯吡嗪等,其中磺胺嘧啶使用量较高。
2. 研究的基本内容
1、河蟹养殖区水样及沉积物样品采集
2、水样和沉积物样品中磺胺类抗性细菌的鉴定
3、水样和沉积物样品中磺胺类抗性基因的初步研究
3. 实施方案、进度安排及预期效果
实行方案:
1、对河蟹养殖水环境中磺胺类药物进行分析与检测;
2、 对河蟹养殖水环境中磺胺类耐药菌株进行分离与鉴定,采用平板计数法进行可培养磺胺类耐药细菌的计数,完成细菌耐药性实验;
4. 参考文献
[1] luo y,mao d, rysa m, et al. trends in antibiotic resistance genes occurrence in thehaihe river, china. environ. sci.technol., 2010, 44, 7220-7225.
[2] valerie b, reeves.confirmation of multiple sulfonamide residues in bovine milk by gaschromatography-positive chemical ionization mass spectrometry[j].j chromatogr.b, 1999, 723: 127-137.
[3] tarbin j a, clarkep, shearer g. screening of sulphonamides in egg using gaschromatography-mass-selectivedetectionandliquidchromatography-mass spectrometry[j].journal of chromatogr. b., 1999,729(1-2): 127-138.