全文总字数：6954字

1. 研究目的与意义及国内外研究现状

如今，蛋白质被广泛用作实验室的试剂，以及应用于许多疾病的治疗中。但是，蛋白质具有不稳定性，这增加了它保存和运输的成本，降低了蛋白质药物的有效性。例如，温度的变化和波动、干燥以及强光都会显著降低蛋白质的生物活性。虽然可以通过冻干法将蛋白质加工成粉末状，从而延长其储存期，降低储存成本，但是在冻干的过程中，蛋白质会暴露在极端温度、ph、低压等恶劣条件下，随着时间的推移蛋白质也会变性，这时就需要添加辅料来协助增强蛋白质的活性。

目前，已经有很多种添加剂已经被用来提高蛋白质的稳定性，可以一定程度上防止蛋白质的聚集和变性。然而，尽管添加了这些辅料，许多蛋白质仍然没有达到预期的效果，没有达到理想的稳定性。因此，研发一种新型的、无毒的蛋白质添加剂，提高药物蛋白的稳定性，保证药物蛋白高效的发挥作用，是一个新型重要的研究领域，有着重要的研究意义。

经研究发现，海藻糖可以用于形成这种稳定添加剂，海藻糖在保护细胞和蛋白质方面起着关键作用，能够使生物体在干燥和低温下有更强的耐受能力，且海藻糖经过美国食品和药物管理局的安全认定，本身安全无毒，非常适合以其为基础研发新型的蛋白质添加剂。本课题围绕海藻糖在经过羧酸化后修饰多肽，对多肽稳定性的影响程度，目的在于能找到一种理想的蛋白质稳定添加剂。

2. 研究的基本内容

经过调查与研究发现，发现几种含有海藻糖单元的聚合物，可以作为蛋白质辅料，对其稳定性有更好的效果，海藻糖在保护细胞和蛋白质方面起着关键的作用，目前已被广泛应用于食品和化妆行业。此外，当海藻糖与某些基团结合形成的海藻糖衍生物，对蛋白质的耐热性和冻干性有显著的提高。这意味着海藻糖聚合物可能成为新型的蛋白质稳定剂，本课题就是研究海藻糖经过羧酸化后形成的聚合物，对蛋白质稳定性的影响以及影响程度。

实验主要分为以下五个部分：

1.制备trtoch2-r

3. 实施方案、进度安排及预期效果

实行方案：实验首先对海藻糖进行处理，分为两步产物。第一步，将海藻糖在吡啶中搅拌，并加入三苯甲基氯，将混合物在氩气条件下搅拌24小时，冷却后加入乙酸酐，在氩气条件下搅拌21小时，真空除去吡啶。向固体中加入水并用氯仿萃取，然后依次进行洗涤，最后用硫酸镁干燥真空浓缩后用硅胶迅速色谱纯化，得到的固体进行第二步反应；第二步将固体溶于氯仿，加入二氯乙酸并搅拌，用相应的洗涤剂洗涤三次后用硫酸镁干燥并真空浓缩。产物经硅胶柱纯化，得到的固体用于进一步羧酸化修饰多肽。

进度：已完成实验的第一步反应，目前正在重复实验，改进实验条件和原料比例以提高产率，便于进一步实验.

预期效果：经羧酸化后的海藻糖修饰多肽后，多肽的稳定性和活性有了显著的提高，并且此种稳定剂易于制备、运输和储存，有望成为新型蛋白质稳定剂。

4. 参考文献

[1]bin zhang,hui-juan cao,hui-minlin,shang-gui deng,hao wu. insights into ice-growth inhibition by trehalose andalginate oligosaccharides in peeled pacific white shrimp ( litopenaeus vannamei) during frozen storage[j]. food chemistry,2019,278.

[2]bin wang,gaoli liu,vasudevanbalamurugan,yulong sui,guannan wang,yisheng song,qing chang. apatitenanoparticles mediate intracellular delivery of trehalose and increase survivalof cryopreserved cells[j]. cryobiology,2018.

[3]boyle william s,senger kyle,tolarjakub,reineke theresa m. heparin enhances transfection in concert with atrehalose-based polycation with challenging cell types.[j].biomacromolecules,2016.