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摘 要

河流中耐药性细菌的数目随着抗生素的广泛使用开始逐年增加，特别引人注意的就是耐药性大肠杆菌。在不同种属细菌之间，抗性基因可以通过其自身的基因突变以及水平传播进行传递，这将会引起相当大的环境问题。基于此，本实验选取淮阴师范学院孙大泓河为代表河流，通过了药敏实验分析了生活污水中菌株的耐药状况。首先从取样的河水中分离出46株菌株，然后对这些菌株进行生理生化鉴定，得出其中30株菌株为大肠杆菌的结果，进而测定了这些菌株对4种常见抗生素的耐药性。通过本次的药敏实验，我们发现受试菌株对阿木西林药物的耐药率甚至达到了46.7%，这一现象可能是由阿莫西林在我国的使用时间相对较早，并且它的使用领域也相对比较广泛造成的；诺氟沙星耐药菌株仅为3%，原因可能是诺氟沙星的临床使用相对较少。于此同时菌株对于头孢噻吩的耐药率为33.3%，这与阿奇霉素的36.7%相近。上述结果表明孙大泓河中大肠杆菌的多重耐药状况严重，这为调查研究孙大泓河对公共卫生的影响具有重要意义。

关键词：生活污水，大肠杆菌， 耐药性，药敏实验

Abstract：The number of antibiotic-resistant bacteria in the river has increased year by year with the widespread use of antibiotics, particularly in the case of drug-resistant Escherichia coli. Among different species of bacteria, resistance genes can be transmitted through their own genetic mutations and horizontal transmission, which can cause considerable environmental problems. Based on this, this experiment selected sun dahong river of huaiyin normal university as the representative river, and analyzed the drug resistance status of bacterial strains in domestic sewage through drug susceptibility test. Physiological and biochemical tests were carried out on 46 strains isolated from the river. The results showed that 30 of them were E. coli, and the resistance of these strains to 4 common antibiotics was determined. Through the medicine sensitive experiment, we found that the tested strains to Westwood drug resistant rate reached 46.7%, even, this phenomenon may be the time by the use of amoxicillin in our country is relatively early, and it caused the areas are relatively widely used; Norfloxacin resistant strain is only 3%, possibly due to the relatively small clinical use of norfloxacin. At the same time, the drug resistance rate of cephalothiophene was 33.3%, similar to that of azithromycin. The above results show that the multi-drug resistance of E. coli in sun dahong river is serious, which is of great significance for the investigation and study of the influence of sun dahong river on public health.

Keywords：sanitary sewage，Escherichia coli，drug resistance，susceptibility testing

目录

1 前言 3

2. 材料和方法 5

2.1材料 5

2.1.1原料 5

2.1.2培养基 5

2.1.3试剂 6

2.2方法 6

2.2.1菌株的活化 6

2.2.2种子液的培养 7

2.2.3培养基的观察 7

2.2.4耐药菌株中大肠杆菌的初步分离 7

2.2.5耐药菌株中大肠杆菌的进一步鉴定 7

2.2.6耐药菌株的生理生化鉴定 7

2.2.7大肠杆菌的药敏试验 8

3. 实验结果与讨论 8

3.1耐药性菌株的初次鉴定 8

3.2耐药菌株的进一步鉴定 9

3.3耐药菌株的葡萄糖（乳糖）产气试验结果 9

3.4耐药菌株的尿素酶试验结果 10

3.5 耐药菌株的枸橼酸盐利用试验 11

3.6大肠杆菌的药敏试验 11

参考文献 14

致谢 17

前言

大肠杆菌（Escherichia coil）有另一个学术名词即大肠埃希氏菌。在1885年，Escherich发现了大肠杆菌。然后的特别久的时间内，人们把大肠杆菌当成了普通的肠道菌群的构成部分。在那个时候的人们都认为大肠杆菌不会引起疾病。接着到了二十世纪的中期，许多的人了解到了某一些特别的血清型的大肠杆菌对动物以及人类，特别是对幼畜（禽）甚至是婴儿有着病原性。它们通常会导致婴儿和幼畜（禽）的持续不断的腹泻和相当严重的败血症。在微生物学上，大肠杆菌属于较为普通的原核生物。由于大肠杆菌有着不一样的生物学特性，我们将其分为了6类。这6类是肠产毒性大肠杆菌、弥散粘附性大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠产毒性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌和肠黏附性大肠杆菌。作为革兰氏阴性细菌（G^-）中的一员，大肠杆菌的大小约为0.5×1~3微米，周围生长着鞭毛，能够自主的运动，无芽孢。大肠杆菌能够通过发酵多种糖类从而进行产气包括产酸，并且大肠杆菌存在于动物以及人类肠道中。在婴儿生下后，大肠杆通过哺乳进入肠道，然后一直存活在肠道中直到人的死亡，并且大肠杆菌的质量几乎占据着粪便干重的1/3。同时大肠杆菌在环境卫生条件不好的情况下，通常会伴随着动物或者人类的粪便而进一步散布在周围的环境中，但是一旦人们在水和食品中检测出了大肠杆菌，就可以认为水和食物是被粪便污染了。在国际上，所有人都承认的卫生监测指示菌即为大肠杆菌。按照我们国家的规定，每毫升居民饮用水中的大肠杆菌菌落的总数必须小于100。

作为城市的水粪便的指示菌，大肠杆菌在很多的情况下能够引起温血动物的肠道感染^[1]，通过很多的事实可以了解到大肠杆菌不仅在土壤、沉积物及水中能够长时间的存在和繁殖，也能够在不同温度的环境中长时间的生存和繁殖^[2,3-8]。在当今社会，水环境中的粪便污染已经是许多的发展中国家乃至发达国家中一个相当严峻的问题^[9]，通过水环境的传播，致病性大肠杆菌可以引发许多严重威害人类健康的疾病，比如说肠炎，腹泻甚至是死亡^[10]。

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