冬凌草甲素为抗癌中药冬凌草中的主要抗癌活性成分,具有资源丰富、毒性低、药理活性强等优势,近年来吸引了广大药学工作者的注意。但目前对于该药的研究主要集中在药理活性方面,对于其制剂研究较少,并且不系统,目前也没有合适的制剂投放到市场。这是主要是由于冬凌草甲素分离提纯工作的难度和它的低溶解度造成的。

本文通过对冬凌草甲素理化性质的初步研究,优化了冬凌草甲素的提取纯化工艺,并对其进一步的纯化工艺进行了研究,增加了冬凌草甲素纯品的纯度和收率。为增加冬凌草甲素的溶解度,使其满足临床需要。

根据冬凌草甲素的理化性质,对其提取分离工艺进行了改进。采用乙醇冷浸提取的方法, 虽然周期较长,但可以避免由于加热回流提取造成的冬凌草甲素的降解。

选题目的与依据：药理研究表明,冬凌草及冬凌草甲素有多方面的抗癌作用。多年的药用历史和临床实践也证实冬凌草确实有一定的抗癌作用。目前冬凌草甲素的制剂研究相对缺乏,无市售产品出现。所以我们认为将冬凌草甲素开发成为抗癌药物有良好的应用前景。冬凌草甲素的提取分离工艺虽有很多研究报道,但是其收率和纯度过低,达不到制剂生产的要求。所以研究冬凌草甲素的分离纯化工作,提高冬凌草甲素的收率和纯度是非常有意义的。

冬凌草甲素在水中的溶解度过低,不能用于注射给药,并且口服药剂贮存运输寿命不长而使其生物利用度很低。因此提高冬凌草甲素的溶解度,及对冬凌草甲素口服药剂的寿命改良是开发冬凌草甲素制剂的关键。

本文旨在从冬凌草中提取分离与纯化冬凌草甲素,使其纯度达到静脉注射给药的要求,并且提高冬凌草甲素纯品的收率。通过参考国内对冬凌草甲素提取分离的文献,制定了其分离纯化的工艺,对工艺进行了改进,使冬凌草甲素粗品的收率有了提高,并且建立了对冬凌草甲素进行进一步纯化的工艺,使其纯品的纯度和收率有了很大提高。由于冬凌草甲素的水溶性不好,本文尝试通过不同溶剂对冬凌草甲素的提取研究

以提高冬凌草甲素的纯度。

冬凌草甲素提取分离工艺的优化冬凌草甲素的提取纯化一般分为提取、浓缩、脱色、再浓缩、硅胶柱分离、结晶等步。在本实验室的研究基础上,本研究将对冬凌草甲素提取分离的主要步骤进行优化。

目前文献报道的冬凌草甲素的提取方法主要有乙醚回流提取法、乙醇回流提取法、乙醇冷浸提取法、超临界提取法、超声提取法等。考虑到乙醚存在安全性和毒性问题,乙醇价廉、安全、易得、适合工业化生产,以及实验室现有条件,选用药用乙醇为提取溶剂。因为有文献报道冬凌草甲素在溶液中对热不稳定,因此采用了乙醇冷浸提取法。

实验中采用旋转蒸发减压回收约三分之二的乙醇后加入适量活性炭脱色。脱色过程中活性炭的用量以及加热回流时间对冬凌草甲素的收率有很大的影响。如果活性炭用量过少,色素去除不彻底,就会使最后的浸膏量很大,不利于上样洗脱如果活性炭用量过多,色素去除彻底,但是会吸附掉很多主药,降低冬凌草甲素的收率。如果加热回流时间过长,由于冬凌草甲素在溶液中对热不稳定,所以会引起主药的降解而加热时间过短,可能会脱色不完全,不利于后面的工作。所以应该在保证脱色比较完全的条件下尽可能少加活性炭,尽可能减少加热回流的时间,以避免药物被吸附损失。