通过在合成期间灵活地安装具有位点特异性的天然或非天然修饰结构，预期合成蛋白超出重组DNA表达系统的边界。

为了实现蛋白质化学合成，肽连接提供了将从固相肽合成（SPPS）获得的短肽片段组装成长肽和蛋白质的有效策略。

在这方面，化学选择性肽连接提供了简单但有效的转化，实现了两个侧链α未保护肽片段的C末端和N末端之间的选择性酰胺形成。

这些反应具有高度化学和区域选择性，能够耐受未受保护的肽上存在的侧链官能团，对于使用毫摩尔浓度或亚毫摩尔浓度的底物具有高反应性，并且操作简单，条件温和，可触及的构建模块。

本帐户重点关注我们的开发丝氨酸/苏氨酸连接（STL）的工作，其源自未保护的肽与C-末端水杨醛（SAL）酯和另一个具有N-末端丝氨酸或苏氨酸残基的未保护肽之间的化学选择性反应。

机械地，STL涉及亚胺捕获，5-内 - 三环 - 链互变异构化，O-至N [1,5]酰基转移以提供N，O-亚苄基缩醛连接的肽，和酸解以再生Xaa-Ser /连接位点的连接（其中Xaa是氨基酸）。

天然存在的蛋白质中丰富的丝氨酸和苏氨酸残基（12.7％）以及STL与各种C末端残基的良好相容性为连接位点提供了多种选择。

必需的肽C-末端SAL酯可以从通过四种可用方法从Fmoc-SPPS和Boc-SPPS获得的肽片段制备（基于酚解，直接偶联，臭氧分解和n 1策略的安全捕获策略） ）。

在蛋白质的合成中（例如，ACYP酶，MUC1糖肽40-mer至80-mer，白细胞介素25和具有可变翻译后修饰模式的HMGA1a），C-to-N和N-to-C序列STL策略已经通过选择时间N-末端保护基团和开启/关闭C-末端SAL酯替代物的适当设计开发了。

在环肽天然产物（例如，达托霉素，teixobactin，cyclomontanin B，云南素C）及其类似物的合成中，分子内头对尾STL已经在含有4-10个氨基酸残基的线性肽SAL酯前体上实施。