摘 要

目前，益生菌已被广泛用于干预和控制肠道菌群的结构和生存力，促进人体健康，预防肠道疾病。为了更好地发挥益生菌的健康调节作用，以肠道益生菌健康促进作用增强的条件为基础制备益生菌制剂，我们研究了C18系列饱和和不饱和脂肪酸对肠道益生菌的影响。实验评估了在生长培养基中加入不同浓度的硬脂酸（C18:0）、油酸（C18:1）、亚油酸（C18:2）、亚麻酸（C18:3）可否对肠道益生菌的生长与疏水性产生影响。采用浊度法测量菌体的OD值，绘制生长曲线，利用微生物粘着碳氢化合物法测定肠道益生菌的表面疏水率。由于益生菌对粘膜表面的粘附性对促进健康起关键作用，我们的结果表明通过添加适量脂肪酸可以调节益生菌的作用。实验表明添加20 μg/mL的油酸、亚油酸、亚麻酸能够延长植物乳杆菌的生长周期，其中亚麻酸对其生长起较好的促进作用，亚油酸、亚麻酸使其疏水性增加。

关键词：自组装 益生菌 脂肪酸 疏水性 比生长速率

The influence of fatty acids on the growth and

hydrophobic of intestinal probiotics

Abstract

At present, probiotics and other health-related functional foods which use the way of intervening and controlling the structure and viability of intestinal flora to promote human health and prevent intestinal diseases have been widely used in the market. In order to exert the effect of probiotics in health regulation better and to produce probiotics preparations on the basis of increasing the health promotion function of intestinal probiotics, we studied the C18 saturated and unsaturated fatty acids about their impact on intestinal probiotics. We assessed whether stearic (C18:0), oleic (C18:1), linoleic (C18:2), linolenic acids (C18:3) at physiological concentrations in the growth media would influence the growth and hydrophobic of intestinal probiotics. We used turbidity method to measure the OD value of the cells and draw the growth curves based on these data. Microbial adhesion of hydrocarbons was utilized to determine the surface hydrophobic rate of intestinal probiotics. As the adhesion to mucosal surfaces is pivotal in health promoting effects by probiotics, our results indicate that the action of intestinal probiotics may be modulated by the addition of suitable fatty acids.The results show that adding 20 μg/mL oleic, linoleic and linolenic acids can lengthen the growth period of Lactobacillus plantarum, in which linolenic acid can promote its growth better, linoleic and linolenic acids increase its hydrophobicity.

Key words: self-assembly; probiotic; fatty acid; hydrophobic; growth coefficient

目 录

摘 要 I

Abstract II

第一章 绪论 1

1.1 前言 1

1.1.1 脂肪酸自组装 1

1.1.2 脂肪酸对乳酸菌的影响 1

1.1.3 微生物疏水性与粘附的关系 2

1.2 课题研究的内容与方法 2

1.2.1 研究内容 3

1.2.2 研究方法 3

第二章 实验内容 4

2.1 主要材料与试剂 4

2.1.1 菌种 4

2.1.2 药品与试剂 4

2.2 仪器设备 5

2.3 培养基 5

2.4 实验菌株的保存与活化 6

2.4.1 菌株保存 6

2.4.2 菌株活化 6

2.5 植物乳杆菌在添加不同种类脂肪酸的培养基中的生长情况比较 6

2.6 植物乳杆菌在添加不同浓度亚麻酸的培养基中的生长情况比较 6

2.7 植物乳杆菌的表面疏水率测定 6

2.7.1 添加脂肪酸的种类与浓度对植物乳杆菌表面疏水率的影响 7

2.7.2 植物乳杆菌菌株表面疏水率的计算与比较 7

2.8 统计分析 7

第三章 结果与讨论 9

3.1 添加脂肪酸的种类对植物乳杆菌生长的影响 9

3.2 添加不同脂肪酸的植物乳杆菌在稳定期的酸度变化 10

3.3 利用最大比生长速率差异对植物乳杆菌生长情况作出评价 11

3.4 亚麻酸的添加量对植物乳杆菌生长的影响 13

3.5 脂肪酸的种类与添加量对植物乳杆菌疏水性的影响 13

3.6 讨论 15

第四章 结论与展望 17

4.1 结论 17

4.2 展望 17

参考文献 18

致谢 21

第一章 绪论

1.1 前言

1.1.1 脂肪酸自组装

在不受外力影响的情况下，构成系统的元素（如分子、纳米材料等）自己主动地聚集并且经过组织形成有一定规则的几何结构的现象被称为自组装（self-assembly）。在元素间作用力（如正负电荷静电作用力、氢键、亲疏水作用等）的驱动下，这种从无序到有序、个体到整体的复杂的协同作用可以发生在自然界中的各种不同的尺度。

脂肪酸是组成油脂的脂肪族一元羧酸，它的结构通式为。我们可按照脂肪酸中存在的双键个数把脂肪酸分为饱和脂肪酸（saturated fatty acids, SFAs）、单不饱和脂肪酸（monounsaturated fatty acids, MUFAs）、多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids, PUFAs）。它结构简单并参与组成了很多更复杂的脂。在有足够氧气的条件下，脂肪酸可经过氧化分解为二氧化碳和水，并释放出大量的能量^[1]。