论文总字数：16076字

摘 要

本实验主要探究了黑水虻幼虫蛋白质的最优提取条件，利用碱溶酸沉法分离出幼虫蛋白，并测定其蛋白的等电点。对提取出的蛋白质从DPPH自由基清除活性能力（DPPH-Free radical scavenging，DPPH-FRS）、金属离子螯合能力（Chelating ability of metal ions，CAMI）、羟基自由基清除活性（Hydroxyl radical scavenging activity，HRSA）和总还原能力（Total reducing power，TRP）方面探究其体外抗氧化活性。研究结果表明黑水虻幼虫蛋白质的最佳提取条件为碱溶解氢氧化钠浓度0.060 mol·100 mL^-1，反应时间120 min，反应温度50 ℃。等电点为4.9。其DPPH-FRS是Vc的0.1571倍，CAMI是Vc的0.091倍，-OH清除活性是Vc的0.161倍，TRP是EDTA的0.111倍。这表明黑水虻幼虫蛋白是一种利用潜力极高的优质蛋白，本实验为黑水虻幼虫蛋白的提取和抗氧化的利用提供了实验数据支持。

关键词：黑水虻幼虫蛋白质 提取 体外抗氧化活性 等电点

Study on extraction of protein from larva of Black soldier fly and its antioxidant activity in vitro

Abstract

This experiment mainly explored the optimal extraction conditions of larval protein of black soldier fly. The larval protein was isolated by alkali solution and acid precipitation method, and the isoelectric point of the protein was determined. To extract protein from the ability of DPPH radical scavenging activity, DPPH - Free radical scavenging, DPPH - FRS), metal ion Chelating ability (Chelating ability of metal ions, CAMI), Hydroxyl radical scavenging activity, Hydroxyl radical scavenging activity, HRSA) and the Total reducing power (Total reducing power,TRP) to explore its antioxidant activity in vitro. The results showed that the best extraction conditions of protein from larva of black soldier fly were 0.060 mol·100 ml-1, 120 min reaction time and 50 ℃ reaction temperature.The isoelectric point is 4.9.Dpph-frs was 0.1571 times of Vc, CAMI was 0.091 times of Vc, -OH scavenging activity was 0.161 times of Vc, TRP was 0.111 times of EDTA. This experiment provides experimental data support for the extraction of protein and the utilization of antioxidant in the larvae of black soldier fly.

Key Words: larval protein of black soldier fly; extraction; in vitro antioxidant activity, isoelectric point

目录

摘要 I

Abstract II

第一章 前言 1

1.1 黑水虻 1

1.2黑水虻幼虫蛋白质 1

1.3 黑水虻幼虫蛋白的提取 2

1.3.1 黑水虻幼虫蛋白质等电点 2

1.3.2 索氏抽提去除虫粉中的脂肪 2

1.3.3 碱溶酸提法 3

1.3.4 离心水洗去盐 3

1.4黑水虻幼虫蛋白质体外抗氧化活性测定 3

1.5 前景 4

1.5.1 抗氧化剂在饲料生产中的现状 4

1.5.2 黑水虻在饲料生产中的利用 4

1.5.3 黑水虻幼虫蛋白抗氧化剂的优势 4

第二章 实验内容 6

2.1 实验原料、仪器及试剂 6

2.1.1 实验原料 6

2.1.2 实验仪器 6

2.1.3 实验试剂 6

2.3 提取方法 7

2.3.1 原料幼虫的去脂前的处理 7

2.3.2 原料幼虫的抽提去脂 7

2.3.3 提取单因素实验 8

2.4 蛋白抗氧化性测定方法 8

2.4.1 DPPH-FRS测定 8

2.4.2 TRP测定 9

2.4.3 CAMI测定 9

2.4.4 HRSA测定 9

第三章 结果与讨论 11

3.1 黑水虻幼虫蛋白质的提取 11

3.1.1 索氏抽提法去除黑水虻幼虫中的脂肪 11

3.1.2 碱液浓度对黑水虻幼虫蛋白质碱溶的影响 11

3.1.3 溶解时间对黑水虻幼虫蛋白质碱溶的影响 11

3.1.4 碱溶解温度对黑水虻幼虫蛋白质碱溶的影响 12

3.1.5 黑水虻幼虫蛋白质碱溶条件 13

3.2 黑水虻幼虫蛋白质等电点的测定 13

3.3 黑水虻幼虫蛋白质提取液的水洗去盐 15

3.4 黑水虻幼虫蛋白质体外抗氧化活性测定 16

3.4.1 DPPH-FRS测定 16

3.4.2 TRP测定 16

3.4.3 CAMI测定 16

3.4.4 HRSA测定 16

第四章 结论 18

参考文献 19

致谢 21

第一章 前言

1.1 黑水虻

黑水虻是一种常见且具有很高科研价值和经济价值的资源化昆虫。水虻科隶属双翅目短角亚目，亮斑扁角水虻就是俗称的黑水虻，起源于南美洲热带草原，二战时期扩散至全世界，在我国也有着广泛分布。

黑水虻作为一种畜禽粪便处理昆虫，饲养成本远低于其他种类的食粪昆虫，其幼虫生活周期较短，具有营腐食性，二龄幼虫取食量很大，能够高效地处理畜禽粪便，并富集营养。并且黑水虻的生长生活环境不会滋生病菌，生活环境也与人类住所相分离，饲养利用黑水虻并不会对现有生态环境产生严重的负面影响。因此它有着得天独厚的利用基础，黑水虻对畜禽粪便有很高的降解率，能明显降低畜禽粪便的堆积污染，并消除畜禽粪便产生的臭味，黑水虻幼虫能取食富集畜禽粪便中的氮、磷和钾，利用黑水虻处理猪粪两天，粪便中的氮、磷和钾含量将会分别降低55.1%、44.1%和52.8%^[1]。由于幼虫能富集其中的有益营养成分，转化为高营养值的水虻虫体蛋白，具有广阔的应用前景。同时因为家蝇在经过黑水虻幼虫取食后的粪便中难以产卵生长，因此利用黑水虻处理后鸡粪，对家蝇有100%的控制率，对小家蝇有99.9%的控制率，能极大改善两种昆虫造成的生物污染，黑水虻也是一种理想的环境改善类生物。

1.2黑水虻幼虫蛋白质

黑水虻幼虫中含高达40%至44%的粗蛋白和35%至40%的油脂，幼虫粉的氨基酸组成明显优于鸡蛋，是一种良好品质评级的幼虫蛋白，氨基酸组成及各项评价指标均优于 FAO/WHO（2013）标准^[2]。此类昆虫的幼虫主要组成成分包括了高价值的可利用蛋白、丰富的动物性油脂和氨基酸，其中的必需氨基酸，例如亮氨酸、缬氨酸和赖氨酸含量较高，是生产制作饲料的原料中的不二之选。研究发现，取食了餐厨垃圾的黑水虻的幼虫粉中不饱和脂肪酸占总脂肪的60.85%，而必需脂肪酸含量占总脂肪的23.72%，油酸和亚油酸，占比分别为 30.7%和21.3%，占比非常高^[3]。作为蛋白质匮乏的重要解决途径，具有广阔的发展利用前景。昆虫的蛋白质在世界储量巨大，对于昆虫的蛋白质体外抗氧化研究目前却很少，仅在环境保护、肥料与饲料的生产等方面有少量成熟的利用。而对于黑水虻的研究也仅在环境改善治理方面有较高热度，其幼虫蛋白质的体外抗氧化活性鲜有报道，因此

其体外抗氧化活性研究必将会创造巨大的科研价值和经济效益。

请支付后下载全文，论文总字数：16076字