谷胱甘肽高产酵母菌破壁方法研究毕业论文
2022-02-23 20:39:08
论文总字数:18698字
摘 要
谷胱甘肽(Glutathione,简称GSH)是一种具有生物活性三肽化合物,它由谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸构成,其化学名为 γ-L-谷氨酰-半胱氨酸-甘氨酸。GSH遍布于整个自然界,在各种细胞中存在。例如内脏细胞,酵母细胞,小麦胚芽细胞中含量巨大,像果蔬,烟草等中也具有一定量。GSH的生理性能也有许多,把它加入食品中,能够强化食物的营养,加强食物的风味,减慢食物的腐坏。在医学领域中有:
(1)对需要巯基的酶起到保护和促进的作用.
(2)清除体内有毒物质和代谢物
(3)促进蛋白质的合成
(4)和转丙氨基、转甲基发生反应,防止肝细胞被破坏
(5)保证的胆红素代谢
(6)促进胆酸代谢,减少出血量。
本论文通过破壁的方法提取酵母细胞中的谷胱甘肽,探索影响谷胱甘肽产量的主要因素,主要实验内容如下:
采用高压均质法对酵母细胞破壁,对压力、破壁温度、料液比三个重要的因素予以探究,由正交实验最后得出结论:破壁的最好的条件是:压力170MPa,破壁温度15℃,料液比18g/L。在最佳条件下,每克酵母细胞生产GSH的量为29.11mg/g。高压均质法破壁后,在显微镜下观察到细胞壁破坏的不完整,所以破壁后将GSH溶液存放在空气中对每克酵母细胞生产GSH的量的影响,经过实验研究,当提取液存放90min时每克酵母细胞生产GSH的量最高。
关键词:谷胱甘肽 破壁 酵母细胞 高压均质法
Abstract
Glutathione (GSH) is a biologically active tripeptide compound consisting of glutamic acid, glycine and cysteine, and its chemical name is γ-L-glutamyl-cysteine - glycine. GSH is spread throughout the nature and exists in various cells. Such as visceral cells, yeast cells, wheat germ cells in a huge amount, like fruits and vegetables, tobacco, etc. also have a certain amount. GSH's physiological properties are also many, add it to the food, can strengthen the food nutrition, enhance the flavor of food, slow down the rot of food. In the medical field there are:
(1) the need for mercapto enzymes play a protective and promote the role.
(2) to remove the body of toxic substances and metabolites
(3) to promote the synthesis of protein
(4) and diaminopropyl, methylation reaction, to prevent liver cells are destroyed
(5) to ensure the metabolism of bilirubin
(6) to promote bile acid metabolism, reduce the amount of bleeding.
In this paper, the glutathione in yeast cells was extracted by breaking the method, and the main factors affecting glutathione production were explored. The main contents are as follows:
The high pressure homogenization method was used to study the damage of yeast cells, and the stress, wall temperature and material ratio were discussed. The conclusion was as follows: the best condition of breaking wall was 170MPa, Breaking temperature of 15 ℃, the ratio of material to liquid 18g / L. Under optimal conditions, the amount of GSH produced per gram of yeast cells was 29.11 mg / g. After the high-pressure homogenization method, the damage of the cell wall was observed under the microscope. Therefore, the GSH solution was stored in the air for the amount of GSH produced per gram of yeast cells. After the experiment, The highest amount of GSH was produced per gram of yeast cells at 90 min.
Key words: glutathione;broken wall;yeast cell;high pressure homogenization method
目录
摘要 II
Abstract III
第一章 前言 1
1.1 谷胱甘肽的概述 1
1.1.1谷胱甘肽的性质 1
1.1.2谷胱甘肽的分布 1
1.1.3谷胱甘肽的生理功能 2
1.1.4谷胱甘肽的应用前景 3
1.1.5谷胱甘肽的生产方法 3
1.2酵母菌破壁方法的研究进展 4
1.2.1高压均质法 4
1.2.2 高压脉冲电场法 4
1.2.3微波加热法 5
1.2.4研磨法 5
1.2.5超声波法 5
1.2.6化学分解法 5
1.2.7生化法 5
1.2.8溶解法 6
1.3谷胱甘肽测定的研究进展 6
1.3.1碘量法 6
1.3.2荧光法 6
1.3.3高效液相色谱法(HPLC) 6
1.3.4分光光度法 6
1.4本课题研究的意义及内容 7
1.4.1本课题研究的意义 7
1.4.2本课题的研究内容 7
第二章 实验方法 8
2.1高压均质法破壁酵母细胞 8
2.2准备、测定与计算 8
2.2.1发酵液的预处理 8
2.2.2分光光度法测定谷胱甘肽 8
2.2.3分光光度法制作标准曲线 8
2.2.4提取液中GSH的测定方法 8
2.2.5酵母干重的计算 9
2.2.6每克酵母细胞生产GSH的量的计算 9
2.3材料与设备 9
2.3.1实验材料 9
2.3.2主要试剂 9
2.3.3主要仪器设备 10
2.4实验方法 10
2.4.1压力对破壁酵母细胞的影响 10
2.4.2破壁温度对破壁酵母细胞的影响 11
2.4.3料液比对破壁酵母细胞的影响 11
2.4.4高压均质法破壁酵母细胞的正交实验 11
2.4.5验证实验 11
2.4.6破壁后将GSH溶液存放在空气中对每克酵母细胞生产GSH的量的影响 11
第三章 实验结果 11
3.1高压均质法破壁酵母菌 12
3.1.1分光光度法测定谷胱甘肽的标准曲线 13
3.1.2压力对破壁酵母细胞的影响 13
3.1.3破壁温度对破壁酵母细胞的影响 13
3.1.4料液比对破壁酵母细胞的影响 14
3.1.5高压均质法破壁酵母细胞的正交实验的结论与解析 14
3.1.6验证实验 15
3.1.7破壁后将GSH溶液存放在空气中对每克酵母细胞生产GSH的量的影响 16
第四章 结论与展望 16
4.1结论 16
4.2展望 17
参考文献 17
致谢 19
第一章 前言
1.1 谷胱甘肽的概述
1.1.1谷胱甘肽的性质
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