气相色谱法测定染发剂中苯二胺类的方法学评价

自古以来，爱美之心人皆有之。随着经济的发展、人们生活水平的提高，染发已经成为了一种时尚。人们在享受染发带来的美的享受的同时，也遭受着染发剂给人体健康带来的伤害。

市场上染发剂的品牌繁多，质量各异。按其成分可分为三大类：无机染发剂(金属染发剂)、合成染发剂(氧化染发剂)及植物染发剂(天然染发剂)。目前市场上近90％的染发剂都含有苯二胺等有毒的化学物质。苯二胺是有机染发剂中常用氧化剂染料。苯二胺是有机染发剂中常用氧化剂染料^[1]，包括对苯二胺、邻苯二胺及间苯二胺三种同分异构体，且均为有毒的化学物质^[2]，2007 年由卫生部颁布的《化妆品卫生规范》中规定，氧化型染发剂中对苯二胺为限用物质，限量值为6%， 而邻苯二胺及间苯二胺为禁用物质。苯二胺的染发原理是在氧化剂作用下被氧化为染料中间体，该中间体又在偶合剂(苯二酚类)的作用下发生偶合反应后产生颜色而染发。苯二胺在化妆品中属于严格限用物质，根据不同的染色需要，染发剂中苯二胺异构体的含量也各不相同。对苯二胺用于将头发染成棕黑色，间苯二胺用于染成青紫色，邻苯二胺用于染成金黄色。

苯二胺在染发的同时其引起的过敏反应非常普遍。染发剂过敏也不决定于品牌或者档次高低，染发剂本身只要含有对苯二胺的化学成分，该化学成分对人体健康的威胁就不会消失。这主要是由于苯二胺是很强的过敏物质，能与头发里的蛋白质结合起来，变成完全抗原，进而导致染发皮炎的发生。长期使用还可能致畸、致突变、致癌及内分泌效应等。对苯二胺在1939年首次被定义为强过敏原，并被选入北美、欧洲和T．R．u．E斑贴试验的标准抗原组，被认为是测试染发剂皮炎的最佳抗原^[3]，Martin.JM ^[4]等也报道了相关病例。对苯二胺也是一种国际公认的致癌物质^[5]。染发剂中有近10种化学物质，经过体内的蓄积作用可造成人体细胞DNA损伤。国外的研究显示，经过体内的蓄积作用可造成人体细胞DNA损伤，经常染发的人群患乳腺癌、皮肤癌、自血病、膀胱癌的发病概率都会增加。张振林等^[6]的研究显示：家兔多次使用染发剂对体细胞具有致癌性、致突变性。

2009年1月5日，央视曝光多个品牌的”一洗黑”洗发水，实际上就是添加但未标明加入了”对苯二胺”（可致癌）的染发剂。由于洗发水的使用频率高，长期累积，很容易对消费者的健康安全造成威胁。央视记者在调查中还发现，在多种染发剂产品外包装和说明书上，除了个别产品标明染发剂有可能引发过敏之外，关于白血病、恶性肿瘤等染发剂可能引起的严重危害都没有提及，而我国的相关标准对此也没有强制性的要求。欧洲的一些专家认为，染发剂只简单标注有可能引起过敏反应，警告内容不够全面，使消费者低估了产品潜在的危险。我国大面积使用染发剂的时间并不长，因此目前染发剂引起的各种健康问题并未引起足够重视。但由于染发人群出现低龄化，这意味着人们染发的时间可能越来越长，染发剂的各种隐性危害很可能在今后几年突现出来。

氧化型染发剂是广泛使用的永久性生染发剂，由多种芳香族类化合物组成，由于这些芳香族类化合物的某些异构体或衍生物具有致敏性或致突变性，因此我国化妆品卫生标准(GB 7916#8212;87)和《化妆品卫生规范》(2007年版)对染发剂中上百种染料的使用量进行了严格规定。针对种类繁多的染料成分，研究人员一直在探寻新的检测方法以适应不断提高的染发剂检测要求，但方法所覆盖的染料种类非常有限。对苯二胺的含量测定方法较多，常用的有高效液相色谱法(HPLC) ^{[7] [8]}和气相色谱法^[9] ，其它还有催化动力学光度法^[10]，方波溶出伏安法^[11]等。我国《化妆品卫生规范》采用高效液相色谱法测定其中8种染料中间体，但该法分离效果不佳、重现性差、易产生假阳性结果且覆盖率低，远不能满足保证染发剂测定结果的准确高效的要求。欧盟指令推荐的薄层色谱法能较好地分离和鉴别各种染料组分，但对其进行精确定量存在一定困难。在用高效液相色谱法分析时，需要精心选择适当的分离条件。而且苯二胺为化学过敏物质，特别是对苯二胺，配好的溶液在几分钟之内就会变色，因为发生了氧化和绾台反应。如果对苯二胺与酚类物质混台配制在一起，则会更迅速地变色。这是因为对苯二胺分子披空气中的氧气氧化后，马上又与酚生成靛酚，使颜色加深。QB／T1863#8212;93中采用10％聚乙二醇20M极性填充柱气相色谱法，测定染发剂中的对苯二胺，但对于苯二胺三种同分异构体的同时检测，尚未有标准方法。

本课题采用气相色谱法来研究染发剂中的苯二胺类物质。苯二胺类物质极性大，挥发度低，再加上染发剂中的其它高沸点添加物，给气相色谱分析带来了不少麻烦。染料中间体极易氧化变质，因此尝试在提取过程中加入还原剂以提高染料的回收率。染发剂提取过程中加入还原剂亚硫酸钠，有效防止了染料中间体变质，大大提高了回收率。我们可根据物质的保留时间及质谱图对复杂样品进行定性确证，同时满足了定性和定量分析的需要。

参考文献

［1］邵栋梁.GC- MS 法测定氧化型染发剂中的苯二胺.化学分析计量，2010，19（2）： 61