番茄来源糖基转移酶的重组表达与性质研究开题报告
2020-05-24 12:17:23
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.糖基转移酶(ugt): 在自然界中,目标化合物的选择性修饰糖通过糖基转移酶催化。
这些酶采用一个激活的基板供体,通常一个核苷二磷酸(ndp)糖,转移的糖基会残留在一个受体分子的特定位置。
在催化转换控制中,糖基转移酶发挥出色的区域选择性和立体化学,因此被公认为具有很高的价值的糖基化催化剂。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究目的:在大肠杆菌中构建出表达的目的基因,后在毕赤酵母中进行分泌表达的过程,实验目的是提高糖基转移酶的生产率 研究手段:从毕赤酵母出发,目的基因在体外进行构建与扩增,确定其序列以及功效。
由于毕赤酵母细胞壁薄,通透性好,因此,可直接通过制备感受态毕赤酵母即可将携带有目的基因片段的质粒导入毕赤酵母中。
主要的操作手段如下: 1.pcr----基因扩增 2.转化实验---将携带有目的基因片段的质粒导入毕赤酵母中进行表达 3.总酶活力的测定
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