抗原表位又称抗原决定簇，它可以是由连续序列（蛋白质一级结构）组成或由不连续的蛋白质三维结构组成，决定抗原性的特殊化学基团。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大，决定簇的数目越多。但各种抗原的决定簇数目不同，如白喉类毒素有8个抗原决定簇，流感病毒有40多个抗原决定簇。抗原决定簇大多存在于抗原的表面，但也有隐藏在抗原内部的，如牛血清蛋白的抗原决定簇多于18个，但只有6个暴露在抗原表面，隐藏于抗原分子内部的抗原决定簇一般是无功能的。抗原分子在酶的作用下，使内部的抗原决定簇暴露出来，才能发挥抗原决定簇的作用。在单克隆抗体(McAb)的特性鉴定中,确定其对抗原构象表位(或抗原决定簇)的特异性是十分重要的。它可为抗原分子的结构和功能分析以及进行生物学方面的研究提供重要的实验依据。

国内抗体生产中对表位的鉴定主要还是依赖ELISA实验去检测，ELISA发展起步较晚，1985年才研制了我国第一批国产生化诊断试剂。但受益于医疗消费水平的提高、医疗体制改革的推动、国家产业政策的扶持，以及本身具有的一次性消费、快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。所以发展迅速，在当代的抗体生产中，临床检测中应用比较广泛。ELISA 可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

在这种ELISA检测方法中有三个必要的试剂：
（1）固相的抗原或抗体，即"免疫吸附剂"（immunosorbent）；
（2）酶标记的抗原或抗体，为"结合物"（conjugate）；
（3）酶反应的底物

其具体可以大致分五个大的步骤：

#183; 包被，即将抗原或者抗体包被到固定相上。

#183; 一抗反应:抗体或抗原与包被原结合

#183; 二抗反应:使带有辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase，简称HRP)的 二 抗与一抗相结合。

#183; 显色反应: 酶反应底物，

#183; 终止反应: 即颜色反应终止OD值稳定

竞争及双位点夹心Elisa对单克隆抗体表位鉴定的比较，竞争抑制实验，主要依据是同一单克隆抗体是识别抗原上相同的表位。在实验中，让抗体和标记HRP的抗体一起加入到96孔酶标板中，两者在酶标板孔内一起竞争原吸附在板孔内的抗原。最后通过HRP的显色反应可以推断出两者是否存在竞争，是否存在相同表位。竞争抑制性实验操作起来比较简单，但是对于数据的处理会比较困难。这个就需要一些经验了 。在双位点夹心ELISA实验中要条件便是要求抗原有多个表位，不同的抗原决定簇，这样可以保证两个抗体都可以结合到抗原上，这是夹心ELISA实验开展的基础，在双抗体夹心法中，以已知抗体(抗HBs)包被载体，然后将含有抗原的待检标本加入，共同孵育后，抗原结合于包被抗体上，再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs)，酶标抗体连接到抗原上，最后加入底物溶液，在双抗体表位测定中根据颜色反应来判定抗原的表位是否一致。