1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1.前言 琥珀酸天然来源是松属植物的树脂久埋于地下而成的琥珀等，此外还广泛存在于多种植物、动物的组织中。

工业上，琥珀酸常由丁烯二酸催化还原制得，琥珀酸也可由丁二腈水解制备。

在实验室中，琥珀酸可用两分子丙二酸二乙酯的钠盐与碘反应，继而水解脱羧制得。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

需解决的问题： 1）分子生物学实验，分别过量表达影响细胞膜成分的来源不同的的whib以及cti基因； 2）对构建正确的重组菌株做进一步的发酵验证； 3）调节诱导条件，实现两种酶的高效表达; 3）发酵效果明显的情况下，进一步对发酵过程做进一步的代谢优化； 4）通过一系列实验验证，目的菌株能够耐受更低pH的程度，同时提高菌株的生长强度和丁二酸的收率。

拟采用的研究手段： 1)菌株与质粒的构建; 2)以实验室菌库Suc260为出发菌株; 3)克隆来源不同的顺反异构酶（cti）基因和全局调控蛋白（whib）目的基因; 4)厌氧发酵。