1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1、环磷腺苷概要 环磷腺苷（camp）是一种具有强生物活性的化合物，分子量329.2，具有一个由单核苷酸amp分子中的磷酸与核糖环化而成的特征性的3#8217;,5#8217;-环式结构，一个camp分子由一个腺嘌呤、一个核糖以及一个磷酸根化合而成。

成品为白色或类白色粉末，无臭，可溶于水，几乎不溶于乙醚、乙醇，对酸、碱、热相当稳定[1]，在强烈条件下水解能使5#8217;位上的酯键断开而失活。

camp有许多衍生物，如6-氨基和2#8217;-o位上发生取代形成的一系列酞基衍生物[2]，其中双丁酞基衍生物（即dbcamf）常用于近代研究和临床治疗，camp衍生物的生物活性比其母体更强[3]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1、主要研究内容及关键技术 1.1主要研究内容 本研究课题为基于腺苷的多酶偶联合成环磷腺苷，旨在通过基因工程的手段过表达腺苷激酶、腺苷酸激酶、乙酸激酶、腺苷酸环化酶。

然后经过多酶偶联技术开发一条合成环磷腺苷的工艺路线，因此，本课题的研究内容包括以下几个方面的内容： （1）利用基因工程的手段分别在大肠杆菌中过表达腺苷激酶、腺苷酸激酶、乙酸激酶、腺苷酸环化酶 （2）酶的纯化及其酶活测定 （3）多酶偶联体系的构建及优化 （4）多酶共表达菌株的构建以及催化性能研究 1.2关键技术 本课题的研究内容主要有两方面，过表达基因工程菌株的构建和多酶偶联体系的构建条件优化。

在过表达基因工程菌株的构建中，需要掌握在表达载体上插入目的片段的基本方法，酶学性质研究的基本方法。