1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1.多聚磷酸盐概要 多聚磷酸盐（polyp）是由3～1000多个不等的正磷酸盐通过高能磷酸键连接而成的线性多聚体，在每一种细菌、真菌、植物和动物细胞中都有发现，由多聚磷酸激酶( polyphosphate kinase，ppk) 催化而成[1-3]。

对于一般微生物而言，poly-p在细胞中的主要作用为：（1）atp的来源。

通过聚磷酶、amp磷酰转移酶和腺苷酸激酶的作用，在磷酸化和无机磷的贮存过程中作为磷酸盐供体提供atp，并在释放atp的同时，为葡萄糖的磷酸化提供磷酸盐、储备无机磷和调节细胞内的ph值等作用；（2）提供部分细菌合成细胞所需的营养和平衡渗透压；（3）维持重金属（如cd2 ，hg2 ）的容许量，通过磷酸盐转移系统排泄重金属；（4）贮存mg2 。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1、 主要研究内容及关键技术 1.1主要研究内容 本研究课题旨在通过基因工程的手段构建过表达多聚磷酸激酶的大肠杆菌重组菌。

然后对产生的多聚磷酸激酶进行酶活分析，因此，本课题的研究内容包括以下几个方面的内容： （1） 利用基因工程的手段构建过表达多聚磷酸激酶的大肠杆菌重组菌，并在大肠杆菌中过表达多聚磷酸激酶 （2） 酶的纯化及其酶活测定 1.2关键技术 本课题的研究内容主要有两方面，过表达基因工程菌株的构建和酶活分析。

在过表达基因工程菌株的构建中，需要掌握在表达载体上插入目的片段的基本方法，酶学性质研究的基本方法。