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摘 要

凝集素是指一种能够专性识别糖基并且与之非共价地、可逆地结合的蛋白质或糖蛋白。本文通过离心、硫酸铵沉淀以及超滤等步骤获得姬松茸凝集素粗品，对其进行血凝实验，结果表明，该凝集素粗品对兔红细胞有凝集作用。并对影响该凝集素粗品凝集活力的温度、pH值、金属离子等进行了研究，结果表明，该凝集素粗品在高温、极酸极碱的条件下活力会降低甚至丧失，糖和金属离子对凝集活力也有一定的影响。

对凝集素粗品的抑菌活性进行了研究。选用4种真菌，用牛津杯法对凝集素的抑菌活性进行检测，实验结果表明，该凝集素粗品对褐腐菌有抑菌作用，其最低抑菌浓度（MIC）为33.88 ug/ml。

关键词：凝集素 糖蛋白 凝集活力 抑菌活性

Properties of Agaricus blazei lectins

Abstract

Lectin refers to a class of glycoprotein which can specifically indentify the glycosylation and bound to it reversibly and non-covalently. The  lectin is obtained from Agaricus blazei by centrifugating, ammonium sulfate precipitating and ultrafiltrating. The hemagglutination experiment shows that the crude lectin can aggregate the rabbit red blood cells. We study the factors that have impacts on the hemagglutination activity, including the temperature, pH, metal ions and so on. The result shows that the hemagglutination activity will be declined and even lost at high temperature, extremely acid and extremely alkaline conditions. Besides, sugar and metal ions also have some influence on the hemagglutination activity.

We also have a study on the crude lectin's antimicrobial activity. We select four kinds of fungi and detect their antibacterial activity by the Oxford cup method. The experiment shows that the crude lectin  has antibacterial effects on the  Brown rot fungi, and the MIC is 33.88 ug / ml.

Key Words: Lectin; glycoprotein; hemagglutination activity; antimicrobial activity

目 录

摘要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1姬松茸的简介 1

1.2凝集素的定义和分类 1

1.2.1凝集素的定义 1

1.2.2凝集素的分类 1

1.3凝集素的分布和结构特性 2

1.3.1凝集素的分布 2

1.3.2凝集素的结构 2

1.4凝集素的生物学特性 3

1.5凝集素生理作用的研究 3

1.5.1作为生化试剂 3

1.5.2作为靶向性的运载工具 3

1.5.3在抗肿瘤方面的应用 4

1.5.4在抗真菌方面的应用 4

1.6本课题研究的目的和意义 5

第二章 实验部分 6

2.1实验材料 6

2.1.1实验试剂 6

2.1.2实验仪器、设备 7

2.2实验步骤 7

2.2.1标准蛋白曲线的制作 7

2.2.2姬松茸凝集素粗品的制备 8

2.2.3凝血实验 8

2.2.4各因素对姬松茸凝集素粗品凝集活力的影响 9

第三章 实验结果与分析 11

3.1温度对姬松茸凝集素粗品凝集活力的影响 11

3.2 pH值对姬松茸凝集素粗品凝集活力的影响 11

3.3金属离子对姬松茸凝集素粗品凝集活力的影响 12

3.4姬松茸凝集素粗品的糖专一性测定 13

3.5姬松茸凝集素粗品的抑菌作用 13

3.6最小抑菌浓度(MIC) 16

第四章 结论与展望 17

4.1结论 17

4.2展望 17

参考文献 18

第一章 文献综述

1.1姬松茸的简介

姬松茸（别名巴西蘑菇），英文名`“Agaricus Blazei Murill”，产自巴西、秘鲁，属担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，蘑菇(黑伞)科，蘑菇(黑伞)属^[1]，它是一种腐生菌，在夏季和秋季生长比较旺盛，比较喜欢高温、湿润、通风的环境，有杏仁味，口感脆嫩。它不仅食用味道鲜美，还含有很多的成分，比如核酸、外源凝集素、多糖、甾醇类及脂质，这些成分使得它具有医疗保健作用，在日本民间通常被用来治疗糖尿病、高血压等疾病。随着研究的不断深入，科学家们发现姬松茸还有着提高机体免疫力，预防及治疗癌症的作用，在日本人们称它为“奇迹的蘑菇”^[2]。

1.2凝集素的定义和分类

1.2.1凝集素的定义

凝集素(Lectin)是指一种能够专性识别糖基并且与之非共价地、可逆地结合的蛋白质或糖蛋白^[3]。如今，越来越多的相关蛋白被发现，科学家对其展开了一系列的研究，主要是针对蛋白质的结构组成和功能作用，并且使凝集素的定义得到了不断的扩充和修正。1980年，Nature杂志是当时比较权威的科技期刊，有5位科学家联名提出了凝集素的新定义:凝集素是指一类能够凝集细胞或者糖复合物沉淀的非免疫来源的糖结合蛋白，由此说明凝集素必须要有与糖结合的专一性以及必须有不止一个的糖结合位点，这样能区分出凝集素，排除激素、酶、毒素、转运蛋白等，这些物质虽然具备与糖结合的能力但是只有一个糖结合位点^[4]。随着时间的推移和科技的发展，凝集素的定义也在不断更新，至少有一非催化结构域且其能可逆地结合到特异碳水合物上是证明一蛋白质为凝集素的唯一前提条件，因此，在1995年，Peumans和Van Damme在把这个作为参考，提出了凝集素的新定义^[5]。

1.2.2凝集素的分类

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