论文总字数：8420字

摘 要

2¯▪自由基、▪OH自由基、DPPH▪自由基的能力最强，其次是普通油菜花“中双7号”、抗草胺膦油菜花“Z7B10” 和普通油菜“中双10号”；油菜花粗黄酮提取物的抗氧化活性与油菜花粗黄酮提取物所含总黄酮的量成正相关，抗草甘膦油菜“Q3”的总黄酮含量最高，其抗氧化活性也最大。

关键词: 油菜花；黄酮；自由基；抗氧化活性

Abstract: Antioxidant activity of flavonoids form four kinds rape flower were evaluated by four methods. Glyphosate-tolerant “Q3” rape flower was signficantly higher than the other three kinds with stronger scavenging effects on hudroxyl free radical, superoxide anion radical and 1,1-diPhenyl-2-picrylhyrazyl free radical as well as total antioxidant capacity. Phosphinothricin “Z7B10” rape flower was similar to ordinary “zhongshuang 10” and ordinary “zhongshuang7” was the lowest. There was a correlation between total flavonoids content and antioxidant capacity in rape flower.

Keywords: rape flower; flavonoids; free radical; biological activity

目 录

1 前言 5

2. 实验材料与方法 7

2.1 实验材料 7

2.2仪器与设备 8

2.3 实验方法 8

2.3.1 供试品制备 8

2.3.2 超氧阴离子自由基（O2¯▪）的清除能力测定 8

2.3.3 羟基自由基（▪OH）的清除能力测定 8

2.3.4 DPPH▪自由基的清除能力测定 9

3 实验结果与分析 9

3.1 抗除草剂油菜花清除超氧阴离子自由基的能力 9

3.2 抗除草剂油菜花清除羟基自由基的能力 10

3.3 抗除草剂油菜花清除DPPH▪自由基的能力 10

结论 12

参考文献 13

致谢 15

1 前言

油菜属十字花科（Cruciferae）芸薹属(Brassic)，是当前研究热门的转基因作物之一，其转化技术建立较早，在1985年Ooms等就利用农杆菌介导法成功获得第一株转基因油菜^[1]。目前全国有三十几个大学或研究所对油菜进行转基因相关研究，已培育出抗除草剂溴苯腈油菜、转PEP高含油油菜、转Bt抗虫甘蓝型双低油菜等性状稳定的转基因油菜；同时，研究者还展开了大量有关生态安全性的研究^[1]。

国外大量商业化种植的油菜主要是抗除草剂油菜，其中包括抗草铵膦油菜和抗草甘膦油菜。转CP4-EPSPS基因的油菜，是最早商业化种植的抗草甘膦油菜。此外，降解草甘膦的草甘膦氧化-还原酶GOX（glyphosate oxidoreductase）基因和EPSPS抗性基因结合可获得有显著抗性水平的油菜，孟山都公司的抗草甘膦油菜品种GT73/RT73就转入了目标基因EPSPS和Goxv247^[2]。抗草铵膦的基因有两种，来自土壤细菌吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）的bar基因和来自S. viridochromogenes的pat基因。国外已经商业化种植的抗草胺膦油菜品种有HCN10、HCN92、HCR-1、MS1×RF1、MS1×RF2、MS8×RF2、PHY14/PHY35、PHY36、T45 等。国内也有科研单位成功培育出转bar基因抗草胺膦油菜品种。

油菜是重要的油料作物，也属于花卉类蔬菜，鲜嫩的油菜花可食用，富含蛋白质、氨基酸、脂质、碳水化合物等多种营养物质，及钙、铁、锌、硒等微量元素。油菜花中黄酮类化合物含量丰富，油菜蜂花粉黄酮主要为黄酮醇苷类，主要包括槲皮素、山奈酚、异鼠李素、柚皮素、芦丁；其中经核磁鉴定的化合物有：山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3,4’-双-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-( 1→2) -β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D -葡萄糖-(2→1)-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-( 1→2) -O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-(2→1)-β-D-葡萄糖苷、5,7,4’-三羟基-8-甲氧基黄酮醇-3-O-β-D-槐糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-( 1→2) -β-D-吡喃葡萄糖苷^[3-5]。

黄酮类化合物是植物体内重要的次生代谢产物，具有多种生物活性如抗癌、抗病毒、抗菌等，其生物活性的基础是抗氧化性。目前已经建立了多种方法用于评价黄酮类化合物的抗氧化活性，大体上分为体内实验法和体外实验法。体内实验法与人体的实际体系相近似，具有一定参考性，但实验相对复杂，耗时长，不适合大量样品的抗氧化活性筛选或粗筛。体外实验法主要有生物评价方法和化学评价方法。生物学评价方法只能反映抗氧化物质的一部分抗氧化活性，而且成本也比较高。化学评价方法相对易于操作，所需费用低，适于初筛。黄酮类化合物抗氧化清除自由基的作用机制有三类：（1）通过酚羟基与自由基进行抽氢反应生成稳定的半醌自由基，中断链式反映；（2）用过抗氧化剂的还原作用直接给出电子；（3）通过抗氧化剂对金属离子的络合降低需金属离子催化的反应^[6,7]。黄酮类化合物的抗氧化能力与其结构有关，B环上有3’,4’邻二酚羟基的黄酮抗氧化能力最强；B环无抗氧化作用时，A环上邻苯二酚结构可以补偿起抗氧化作用^[8,9]。应用比较广泛的化学评价方法有还原金属离子型方法，清除自由基型方法，抑制过氧化型方法等。下面主要介绍3种清除自由基型方法。

对O₂^-▪的清除，O₂^-▪可将氮蓝四唑还原为不溶于水的蓝紫色物质，在560nm处有最大吸收峰，若被测物质具有抗氧化活性，O₂^-▪对氮蓝四唑的还原能力将减弱，用分光光度法测定出氮蓝四唑还原产物可以反映物质抗氧化的活性。

剩余内容已隐藏，请支付后下载全文，论文总字数：8420字