论文总字数：8558字

摘 要

论文研究了不同益生菌发酵对豆类原料（豌豆、豆粕）脲酶活性的影响。本研究所用到的益生菌有：枯草芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌。结果表明，豌豆中的脲酶活性比豆粕中的脲酶活性强。随着发酵时间的增长，脲酶活性差异逐渐显著（Plt;0.05）。用马克思克鲁维酵母将豌豆进行24h发酵处理，此时的豌豆脲酶活性明显降低；用乳酸菌21809将豆粕进行24h发酵处理，此时的豌豆脲酶活性明显降低。这表明用马克思克鲁维酵母将豌豆进行24h发酵处理最为合适，用乳酸菌21809将豆粕进行24h发酵处理最为合适。

关键词：枯草芽孢杆菌，乳酸菌，酵母菌，发酵，豆类，脲酶

Abstract: The effects of different probiotic fermentation on urease activity of pea and soybean meal were studied in this paper. The probiotics used in this study are Bacillus subtilis, lactic acid bacteria and yeasts. The results showed that the activity of urease in pea was stronger than that in soybean meal. With the increase of fermentation time, the difference of urease activity became more significant（Plt;0.05）. The pea was fermented with Kluyveromyces marxianus for 24h fermentation, and the urease activity of pea decreased obviously, and the soybean meal was fermented with lactic acid bacteria 21809 for 24h, and the urease activity of pea was obviously reduced. This indicated that Kluyveromyces marxianus fermentation was most suitable for 24h fermentation of pea, and 24h fermentation with Lactic acid bacteria 21809 was the most suitable.

Keywords: Bacillus subtilis, Lactic acid bacteria,Yeast, Fermentation, Beans,Urease

目 录

1 引言 ...................................................6

2 材料与方法 .............................................6

2.1 试验材料..............................................6

2.2 试验方法..............................................7

2.3 指标测定 .............................................7

2.4 数据分析 .............................................9

3 实验结果 ...............................................9

3.1枯草芽孢杆菌对豆类原料脲酶活性的影响...................9

3.2乳酸菌对豆类原料脲酶活性的影响........................10

3.3酵母菌对豆类原料脲酶活性的影响........................11

4 分析与讨论.............................................13

参考文献 ................................................15

致谢 ....................................................17

1 引言

豆类营养价值比较高，含有丰富的蛋白质，是一种营养丰富、营养物质含量均衡的植物性蛋白饲料源。有些豆类不仅含有丰富的蛋白质，还含有大量可食用的油脂，可用作动物饲料^[1]。但由于其中的抗营养因子太多，蛋白质结构比较复杂，如果不对豆类原料进行加工处理，那么，豆类原料中的营养物质的吸收利用率将降低，从而导致原料的浪费，提高了饲养动物的成本^[2]。

在众多的抗营养因子中，脲酶，是主要的热不稳定性抗营养因子。它会导致尿素循环中产生过多的氨，因为脲酶能水解尿素，产生二氧化碳和氨。如果动物采食了未完全除去脲酶的豆类饲料，将会导致氨中毒^[3]。所以，如何降低豆类中的脲酶活性就成了一个非常有意义的研究课题。

益生菌发酵技术是近几年发展起来的技术，它具有很多优点，是新型饲料技术。研究发现，豆类饲料经益生菌发酵后含有更多的活性益生菌菌体以及各种酶等,起到促进动物生长的作用^[4]。我们发现，利用益生菌发酵技术，可以使得益生菌增加，并且产生过氧化氢、细菌素等抑制物质，从而影响脲酶活性^[5]。所以，益生菌发酵能够降低豆类原料中的抗营养因子含量，消除抗营养的作用^[6]。

因此，本研究通过用乳酸菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌三类益生菌对豆粕、豌豆进行动态发酵处理，来研究这三类益生菌发酵对豆类原料脲酶活性的影响，从而找到降低豆类原料中脲酶活性的最优发酵方式。本实验的目的则是从发酵菌种的角度出发，优化豆类饲料生产工艺参数，为指导实际生产动物饲料提供科学依据。

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1　菌种　

热带假丝酵母（Candida tropicalis）、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis ）20506和21095、乳酸菌（lactic acid bacteria ）20764和21809、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

马克思克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus）和枯草芽孢杆菌BJ-3由张瞳老师馈赠。

2.1.2 原料及处理　

发酵原料：豆粕；豌豆。将原料除杂后均进行超微粉碎，100目过筛，作为益生菌发酵基础料。

2.1.3 培养基配制

酵母培养YPD培养基的配制：一号试剂瓶加入10g酵母膏、20g蛋白胨和20g琼脂，再加入900ml水；二号试剂瓶加入100ml水再加入20g葡萄糖。将一号试剂瓶和二号试剂瓶分别配制灭菌后，待温度冷却至60-70度后混合均匀。

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