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不同添加剂对里氏木霉CMCase酶活力的影响

 2024-01-11 08:56:40  

论文总字数:9033字

摘 要

纤维素酶活是通过测定滤纸酶活和CMC酶活来确定的。CMC酶活是把3 ,5 - 二硝基水杨酸(DNS) 作为显色剂,把CMC-Na作为底物,在540nm下来进行测定吸光值,再根据葡糖糖标准曲线计算出糖含量,最后计算出酶活。本文主要研究了不同添加物对CMC酶活的影响,从而为高效率、低成本、工业化生产纤维素酶提供科学依据。

关键词:纤维素酶,羧甲基纤维素酶活

Abstract: Cellulose enzyme activity is through the determination of filter paper enzyme activity and CMC enzyme activity.Filter paper enzyme activity is to put the 3, 5-2 nitro salicylic acid (DNS) as chromogenic agent, the filter paper as the substrate, absorbance value is determined at 540 nm down, again according to the standard curve to calculate the glucose sugar sugar content, finally calculate the enzyme activity.While CMC enzyme activity is based on sodium carboxymethyl cellulose substrates for determination.This paper mainly studied the different additives on the influence of filter paper enzyme activity, thus for high efficiency, low cost, provide a scientific basis for industrialized production of cellulase.

Keyword:Cellulase,CMC

目录

1.前言 6

2 材料与方法 7

2.1 菌株 7

2.2 试剂 7

2.3 仪器 8

2.4 实验方法 8

2.4.1 原理 8

2.4.2 葡萄糖标准曲线的制作 9

2.3.3 液体摇瓶培养基(100mL)[14]: 10

2.4.4 添加剂添加方法: 10

2.4.5 CMCase酶活力测定 12

3 结果与分析 13

结论 15

参考文献 16

致谢 17

1.前言

由于植物的光合作用,地球上有最丰富、最廉价的纤维素资源,据报道,全世界每年有1500亿吨干物质植物生成,其中纤维素和半纤维素的总重量为850亿吨[1]。我国每年有5亿吨光作物秸杆,远高于全国粮食的总产量,其价格如按每吨100元算,总价格约为500亿元.全国草原牧区的贮草总共不过1000万吨,只有秸杆总量的2%。作物秸杆过去常被作为燃料处理,近年来由于人民生活水平不断的提高,秸杆已不再作为燃料,大量的作物秸杆无法处理,在农村各地常采用焚烧方法来处理作物秸杆,这样就造成了社会环境的污染,尤其是农村的主要污染源[2]。城市的污染更多,其中大量生活污泥的处理与处置也是我国目前亟待解决的环境问题。堆肥化处理是使污泥无害化、资源化的一条有效途径,具有广阔的应用前景[3]。因此,把秸秆作为调理剂混合到污泥中进行堆肥化处理,能够有效地处理农村和城市的两大有机固体废物污染问题,并达成资源重新利用的结果,具有较好的环境和经济效益。作物秸秆纤维素、半纤维素和木质素的含量高,而粗纤维素是一类相当难分解的物质,要解决秸秆污泥的堆肥问题应先解决纤维素的降解问题[4]

纤维素酶属于糖苷水解酶,传统上被分为3类组分:内切葡聚糖酶(endo21,42β2D2glucanase,EG,EC3.2.1.4),CMC酶;外切葡聚糖酶(exo21,42β2D2glucanase,EC3.2.1.91),即纤维二糖水解酶,CBH;β2葡萄糖苷酶(β21,42D2glucosidase,EC3.2.1.21),简称BG。[5]纤维素生产乙醇或其他化工产品的关键是要把纤维素降解为葡萄糖,即纤维素糖化的过程.目前,对纤维素的糖化过程研究较多的是酸水解法[6]、酶水解法[7]

目前,纤维素酶的应用主要集中在微生物纤维素酶的应用上。纤维素酶已被广泛应用于酿酒、食品、纺织、洗衣、饲料加工、农业等多个领域中。在食品业中,纤维素酶被用于:果蔬汁及橄榄油的提取,豆类发芽中豆衣的去除,谷物的浸泡效率和水分的吸收,果汁的澄清,从大豆和叶子中分离蛋白质以及谷物和马铃薯中淀粉类的有效分离等。另外,纤维素酶也被用来增加食品的营养成分,从纤维素废弃物中提取葡萄糖、纤维寡糖和其他可溶性的糖,以及除去细胞壁以利于有用物质如酶、多糖和蛋白质等的释放。[8]在白酒酿造过程中所用的原料,传统工艺采用的是糖化酶水解,只能将原料中的淀粉降解使其转化成糖,而大部分纤维质成分则不能转化,而被白白浪费掉。但是在糖化过程中加入纤维素酶,添加量为11U/g,淀粉出酒率就可以提高1.2%,发酵周期将缩短6h。[9]纤维素酶作为一种高效生物催化剂,因其具有可降解性及对织物能产生可控的整理而广泛应用于纺织行业。其中,牛仔布的仿旧整理及纺织品的生物抛光是纤维素酶最成功的应用。采用纤维素酶洗涤不仅能对纤维表层进行可控的“刻蚀”,使织物产生不均匀的褪色,而且对织物内部纤维的强力不会过度损伤。纤维素酶的使用一方面有利于保护环境;另一方面,处理后的织物手感细腻、柔软、耐用性增强,因而纤维素酶洗工艺已广泛取代了传统的石磨水洗。[10]

下面我将通过添加不同的添加剂来调节羧甲基纤维素酶的活力.

2 材料与方法

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