前言

上世纪 90 年代，多肽领域研究进入一个崭新的发展阶段。研究表明，生物体内含量极微的活性肽在生命过程中起着重要的调控作用[1-3]，这些活性肽与生物的发育、生长代谢、免疫、疾病、学习、记忆和衰老都有有极其密切的关系。与传统药物相比，活性肽具有药用活性高、生物利用性好、副作用少等优点。近几年，多肽药物已发展成为国际市场上的一大类重要药物[4-6]。在对多肽的结构与功能研究过程中，必然会涉及多肽的测定与分析。目前，多肽的测定与分析主要包括结构的测定与分析（即测定多肽的氨基酸组成、含量）及多肽测序（即组成多肽的氨基酸的连接次序）。

1 多肽简介

两分子氨基酸经脱水以酰胺键联接生成的化合物称为多肽。肽分子中的酰胺键称为肽键［7］。由两个氨基酸形成的肽叫二肽，三个氨基酸形成的肽叫三肽，肽分子中的每一个氨基酸部分称为氨基酸残基，开链状的肽的自由氨基一端称为肽链的氨基末端或 N 端，另一端则称为羧基末端或 C 端。通常把小于 10 个氨基酸残基的肽称为寡肽或小分子肽，10 ～ 80( 或 100) 个氨基酸残基的肽称为多肽。

在温和反应条件下，肽键的形成是通过活化一个氨基酸( A) 的羧基部分，第二个氨基酸( B) 则亲核进攻活化羧基部分而形成二肽。在肽合成过程中，对不参与肽键形成的所有官能团必须用暂时、可逆的方式予以保护，即每一个肽键的形成，包括三个步骤: 第一步，对缩合反应中不参与反应的活性部分进行保护; 第二步，N － 保护氨基酸的羧基必须先活化为活性中间体，随后于羧基保护的氨基酸进行缩合形成肽键; 第三步，对保护基进行选择性脱除或全脱除。

2 氨基酸保护

2. 1 氨基保护及脱保护

用于氨基保护的保护基数目很多，按其结构可分为烷氧羰基、酰基、烷基三大类。烷氧羰基是目前应用最广的氨基保护基。

2. 2 羧基保护及脱保护

目前已知的大多数羧基保护基是由一级、二级，或三级醇制备的酯。