1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1.耐高温蛋白酶概述

工业催化需要在极端条件下进行，而天然酶促反应条件较温和，因此常常无法满足工业化生产，因此，其工业化应用受到极大限制。嗜热蛋白酶是一类最适作用温度为60～80℃的蛋白酶^[1]，对高温、酸碱、有机溶剂、蛋白变性剂的良好抗性且稳定。因此，人们十分重视嗜热蛋白酶的研究。嗜热蛋白酶主要来源于嗜热微生物。嗜热微生物是一类生长温度跨度在40～150℃间的微生物，目前嗜热蛋白酶产生菌中以芽孢杆菌最常见^[2]。例如，bacillus sp.mo-1^[3],b.sp.ea.1^[4],b.thermoproteolyticus^[5]。此外在真菌、放线菌中亦有所报道。天然的耐高温菌多见于高温温泉、火山口、沙漠以及许多人工环境如热水管道等特殊高热环境中。

1.1.耐高温酶促反应优势

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

天然的高产蛋白酶菌株，往往其产酶活性在温度升高的情况下急剧下降，无法适应在工业生产中的应用。而通过基因定向改造，则可以很好的解决这一问题，在基因定向改造的所有方法中又以理性设计这一方法最优，这是一种是基于对蛋白质结构和功能关系的认识，通过定点饱和突变技术改造蛋白质的方法。避免传统方法中人力、物力和财力的浪费。

本论文研究内容为：

(1) 嗜热蛋白酶克隆表达体系构建；