羧酸还原酶与多聚磷酸激酶耦联催化体系的构建文献综述
2020-05-02 17:11:10
文 献 综 述 1 羧酸还原酶 1.1 羧酸还原酶概述 羧酸还原酶(Carboxylic acid reductase,CAR)广泛存在于细菌、真菌及植物中,第一个CAR(NcCAR)于19世纪70年代在Neurospora crassa 中被发现。
CAR可催化羧酸还原为相应的醛,在此过程中消耗ATP,并以NADPH为氢电子供体。
来自分枝杆菌的羧酸还原酶可将多种脂肪酸(C6-C18)转化为相应的醛,并与醛还原酶或醛脱碳酶一起转化为脂肪醇(C6-C18)或脂肪烃(C7-C15)。
1.2 羧酸还原酶的广泛底物谱 羧酸还原酶可以转化许多种底物,包括脂肪酸、芳香族酸、多环酸和杂环酸。
来自不同物种的CAR的底物谱大多是交叉的,但也有例外,如Segniliparus rotundus 的SrCAR是唯一可以还原硝基苯甲酸衍生物的羧酸还原酶[1]。
1.3 羧酸还原酶的催化反应 羧酸还原酶的催化中心具有4'-磷酸泛酰巯基乙胺的辅基,它可通过磷酸二酯键与丝氨酸残基共价连接。
催化反应的反应机理涉及三个关键步骤:(1)脂肪酸底物腺苷酰化形成AMP-脂酰基复合物;(2)在脂酰基部分和磷酸泛酰巯基乙胺辅基之间形成硫酯键;(3)硫酯中间体还原为醛[2]。
1.4 羧酸还原酶的应用 转化羧酸为相应的醛,如利用NiCAR(来自Nocardia iowensis)与三个同源基因构建的菌株生产香草醛;转化羧酸为醇和烷烃,如MmCAR(来自Mycobacterium marinum)与醛还原酶基因构建的大肠杆菌BL21(DE3)菌株;转化羧酸为哌啶或吡咯烷,如一锅法加入CAR、ω-转氨酶(ω-TA)和亚胺还原酶使酮酸或酮醛还原为单/双取代的手性哌啶或吡咯烷;转化羧酸合成药物,如天麻素、抗氧化剂等[3]。
2 多聚磷酸激酶 2.1 多聚磷酸激酶概述 多聚磷酸(polyP)是由高能磷酸键连接数个磷酸基团组成的多聚体。
多聚磷酸激酶(Polyphosphate kinase,PPK)催化polyPn polyPn 1 ,存在于多种细菌中。