1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1．引言 黑曲霉（asperillus niger）作为工业应用的常用菌种之一，其产品具有高度的稳定性和安全性。

其产品一是以糖化酶为代表的酶制剂，二是以柠檬酸为代表的有机酸。

柠檬酸作为食品、化工、医药等领域需求量极大的有机酸，其目前传统的深层液体发酵工艺却存在诸多弊端，例如副产物多，耐受性差，转化率低等问题。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

在BLAST数据库分析到YvcA基因后，对其进行PCR扩增，得到单片段；通过overlapPCR技术连接三个基因片段；进行黑曲霉原生质体转化实验；选择转化成功、基因敲除的黑曲霉菌落，进行菌落PCR验证，传代培养；对菌株进行生物膜表征测定（SDS、刚果红抗逆性实验，结晶紫染色实验）；进行固定化发酵，测定柠檬酸和还原糖的含量，与正常黑曲霉比对。