天冬氨酸β脱羧酶基因的克隆与表达开题报告
2020-05-02 18:28:50
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文献综述 1.l-丙氨酸 1.1 l-丙氨酸的理化性质 l-丙氨酸(l-alanine),是蛋白质的基本构成单位,也是一种脂肪族的非极性氨基酸,它是组成人体蛋白质的20种氨基酸之一,是人体的非必需氨基酸,呈无色至白色结晶状粉末,可溶于水和乙醇,不溶于乙醚和丙酮,温度在200℃时升华,264~296℃范围发生分解。
l-丙氨酸的化学结构及其相关性质如表1-1所示。
1.2 l-丙氨酸的功能及应用 1.2.1 l-丙氨酸在食品上的应用 l-丙氨酸是存在于许多食品中的一种氨基酸,已经用作食品的添加剂,如防腐剂、风味调味料、氨基酸低度酒和饮料、强壮剂或强壮食品。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1.本课题要研究或解决的问题 本研究的目的是利用分子生物学手段,拟将来源于p.dacunhae的l-天冬氨酸β-脱羧酶基因asp d克隆至载体pet-22b上,转化至宿主大肠杆菌bl21(de3)中,构建具有良好辅酶再生体系的高效表达l-天冬氨酸β-脱羧酶的基因工程菌。
进一步通过iptg诱导表达l-天冬氨酸β-脱羧酶。
2.本论文的实验内容包括四个方面: 2.1目的基因的克隆,提取假单胞菌atcc 20147的基因组,以改基因组为模板,设计引物克隆的l-天冬氨酸β-脱羧酶基因asp d(gen bank ab091385.1), 2.2重组质粒的构建,pcr目的基因经胶回收后利用nco1和xho1两个酶切位点与载体pet-22b经dna连接酶连接,得到重组质粒并转化至e.coli感受态细胞中。