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重组大肠杆菌的构建和酶的诱导表达任务书

 2020-05-04 21:29:05  

1. 毕业设计(论文)的内容和要求

由金唯智公司亚克隆木糖还原酶和葡萄糖脱氢酶于petduet质粒上,将该质粒热激转化导入e.coli bl21,对于阳性菌落进行质粒提取和酶切验证,之后在合适的条件下诱导表达,使大肠杆菌同时表达木糖还原酶和葡萄糖脱氢酶。

之后进行sds-page电泳观察蛋白表达结果。

木糖还原酶可催化木糖生成木糖醇,消耗nad(p)h,葡萄糖脱氢酶可催化葡萄糖生成葡萄糖酸,生成nad(p)h,两者可形成酶催化偶联体系,使辅因子循环利用,可应用于玉米秸秆水解液的处理。

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2. 参考文献

1.Cirino, P. C.; Chin, J. W.; Ingram, L. O. Engineering Escherichia coli for xylitol production from glucose-xylose mixtures. Biotechnol. Bioeng. 2006, 95, 1167?1176. 2.Albuquerque, T. L.; da Silva, I. J.; de Macedo, G. R.; Rocha, M. V. P. Biotechnological production of xylitol from lignocellulosic wastes: A review. Process Biochem. 2014, 49, 1779?1789. 3. de Freitas Branco, F. B.; dos Santos, J. C. d.; da Silva, S. S. d. A novel use for sugarcane bagasse hemicellulosic fraction: xylitol enzymatic production. Biomass Bioenergy 2011, 35, 3241?3246

3. 毕业设计(论文)进程安排

2018/12/10-2019/2/19 完成课题背景研究 2019/2/20-2019/4/10 熟悉实验并初步完成实验框架 2019/4/11-2019/5/10 独立进行相关课题的研究,论文书写 2019/5/11 -2019/6 整理并修改完善论文,准备毕业答辩 具体安排可变动,参照学校相关要求

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