重组大肠杆菌的构建和酶的诱导表达开题报告
2020-05-05 17:12:47
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
重组大肠杆菌的构建和酶的诱导表达实验文献综述 1.木糖醇简介 木糖醇为五碳糖醇,分子式为c5h12o5,白色结晶状,溶解度等理化性质与蔗糖很相似,是木糖代谢的正常中间产物,广泛存在于自然界中,在化工、食品、医药等工业中有着广泛应用[1,2]。
自然界中,许多水果蔬菜中都含有木糖醇,但普遍含量很低,提取成本很高。
同时木糖醇用处很广,从它的甜度上来看,木糖醇可以替代蔗糖[3],从发热量来看,又可以媲美葡萄糖,另外木糖醇还可以防龋齿,最重要的是木糖醇不受胰岛素调节,在人体内代谢完全,可以作为糖尿病人的热能源。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
本实验要解决的问题和拟采取的手段: 要解决的问题:近年来,木糖醇需求量不断增大,而木糖醇的主要工业生产手段是化学合成法,化学合成需要高温高压的条件,成本高,所以为了解决这些问题,生物转化法制备木糖醇成为了国外内外研究的热点。
在生物转化法将木糖转化为木糖醇的过程中,木糖还原酶是木糖代谢过程中至关重要的酶,且是氧化还原酶,需要在辅酶作用下才起作用,所以本实验构建木糖还原酶和葡萄糖脱氢酶的催化偶联体系,进行大肠杆菌全细胞催化反应,循环利用nadph,可以进行高效经济的木糖醇生产,降低成本。
采取的手段: 以大肠杆菌为宿主菌,将木糖还原酶基因序列和葡萄糖脱氢酶基因序列亚克隆到质粒petduet上,导入大肠杆菌中诱导表达,为后续酶催化反应进行准备。